双酚A（Bisphenol A,BPA）为2,2-二（4-羟基苯基）丙烷,由于它的化学结构与雌激素类似,在体内通过与雌激素受体结合或影响细胞信号传导途径等方式模仿或干扰内源雌激素作用,发挥雌激素样效应。它对人的皮肤、呼吸道、消化道和角膜有刺激性。当体内的双酚A达到一定量会造成慢性中毒,使人出现不同程度的头昏、皮疹、精神不安、腹泻等症状。双酚A原本在自然界并不存在,但近年来在世界各地各种水体和空气中都有发现,尤为严重的是食用聚碳酸酯（PC）包装材料、婴儿奶瓶和广泛应用的桶装饮用水瓶均发现有双酚A溶出,危害人类健康。因此,研制双酚A的纳米金标记试纸条和ELISA检测试剂盒,对保护消费者健康和食品安全检测具有十分重要的意义。本论文开展双酚A人工抗原合成、酶联免疫分析方法建立及检测应用研究,结果如下:首先对双酚A进行结构修饰,引入羧基基团,采用碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺混合法将结构修饰了的双酚A与牛血清蛋白偶联制备双酚A人工抗原,经紫外光谱、红外光谱对人工抗原进行鉴定,结果表明:合成的人工抗原紫外光谱图中具有蛋白质和双酚A的特征吸收峰,人工抗原红外光谱图中呈现双酚A和牛血清蛋白的红外特征吸收峰,鉴定结果表明双酚A人工抗原合成成功。通过免疫Balb/C小鼠制备了双酚A多克隆抗体,抗体效价为256000,抗体最适工作浓度为1:4000,最佳包被浓度为10μg·mL^-1,通过优化实验,确定最佳包被条件为37℃下温育1h,然后4℃下12h。间接竞争ELISA法测定双酚A结果表明:双酚A浓度在10μg·L^-1～1×10⁵μg·L^-1范围之间曲线呈良好的线性关系,线性回归直线方程为y=0.1038x+0.0007,相关系数R²=0.9761。双酚A的检测范围为83.18～5.01×10⁷μg·L^-1,检测限为9.06μg·L^-1,IC₅₀=64565μg·L^-1;方法特异性测定结果表明与苯酚交叉反应率为0.06%,苯、对羟基苯酚、邻羟基苯甲酸、叔丁基苯均少于0.01%,说明该抗体对双酚A具有较强的特异性。间接竞争ELISA法对桶装水、河水、工厂三种水样中双酚A的含量进行了初步的定性定量检测。检测表明PC桶不仅会向桶装水中释放出BPA,而且BPA的浓度会随着时间的增长而增加,30日的溶出量超出300μg·L^-1,回收率范围为88.03～100.91%;河水中未检出双酚A,回收率范围为98.46%～100.65%;两家使用双酚A的工厂地表水样中检出BPA的浓度分别为114μg·L^-1和304μg·L^-1,回收率测定结果分别为89.10～100.16%和93.42～100.49%;紫外分光光度法的测定结果证实了间接竞争ELISA法的可靠性。回收率试验结果表明该实验方法具有较好的准确性,可以初步应用于对环境水样中双酚A定量检测。