随着社会节奏日益加快,现代人的生活压力也不断增加,越来越多的人出现失眠的症状,严重影响人们的日常生活与身体健康。目前,治疗失眠的药物主要有苯二氮卓类、抗抑郁、抗精神病和抗组胺类药物等,但这些常用的镇静催眠类药物常伴有多种副作用,如:嗜睡、头昏、乏力、焦虑等,而且易引起服用者的依赖性和成瘾性,长期使用会对人体造成严重的伤害。现代研究发现,许多中药都含有镇静安神作用的活性成分,而且这些天然物质不良反应较少,具有广阔的开发应用前景。目前,具有改善睡眠作用的中药有90余种,其中临床使用较多的是刺五加,酸枣仁,柏子仁,石菖蒲,五味子,丹参,灵芝,天麻等。但是对这些中药的研究大多集中在化学成分的提取分离上,而其活性成分（如天麻素、酸枣仁皂苷、五味子醇甲、钩藤碱等）的起效机制尚不清楚,至今仍没有中药源为主要成分,用于失眠治疗的新药。前人的研究已经证明:刺五加提取物具有保护神经元,改善人体植物神经系统紊乱及促进睡眠等作用。但对活性单体及其作用机制的研究非常少,这严重制约了刺五加的进一步研究开发与利用。因此本论文通过借鉴中药血清药物化学的经验,针对刺五加中与中枢神经系统相关的4个代谢入血成分,对其分子作用靶点进行筛选与验证,尝试在分子水平阐明刺五加镇静安神的药理机制。本论文主要利用镇静安神相关的9个受体(5HT_1B、5HT_2A、MT₁、MT₂、D₁、D₂、D₃、OX₁、OX₂)高表达细胞模型,对刺五加中4个入血成分（紫丁香苷、金丝桃苷、刺五加皂苷E、1,5-二咖啡酰基奎宁酸）进行靶点筛选;再利用细胞热转变分析（CETSA）研究化合物与靶点蛋白的结合情况。结果表明在刺五加的代谢入血成分（紫丁香苷、金丝桃苷、刺五加皂苷E、1,5-二咖啡酰基奎宁酸）中,刺五加皂苷E能激活MT₂高表达细胞模型介导的下游ERK的磷酸化水平,且呈剂量依赖性,说明刺五加皂苷E能通过MT₂受体发挥作用;并通过细胞CETSA与裂解液CETSA实验,证明刺五加皂苷E与MT₂受体相结合,说明褪黑素MT₂受体是刺五加皂苷E的靶点蛋白,从而为研发特异性强、靶点明确的镇静安神药物提供了科学依据。