论文部分内容阅读
背景与目的:作为现代医学必要的治疗手段,腹部外科手术可治疗消化系统、泌尿生殖系统等多种疾病,疗效显著,然而手术在治疗疾病的同时也常常导致多种并发症。术后并发症的发生大大降低了患者的预后和生活质量,因此避免术后并发症成为促进术后康复的一项重要内容。术后腹腔粘连是腹部手术后最常见的并发症,难以避免且可能引发女性不孕、肠梗阻等严重继发症,是术后康复领域的重要难题。即使腹腔镜、宫腔镜等腹部微创手术的应用一定程度上减少了手术对机体造成的创伤,也仍然不能完全避免术后腹腔粘连的发生。医学工作者针对术后腹腔粘连进行了多方面探索,取得了一定进展,然而目前为止临床上尚未发现一种方法可完全预防术后腹腔粘连。中医药具有副作用小、价格低廉、避免二次损伤的特点,随着传统医学与现代医学的发展,中医药在促进术后康复领域显现出独特的优势。中医学认为,术后腹腔粘连的形成是机体局部气滞血瘀、腑气不通的结果,川芎作为活血化瘀类中药,具有活血化瘀、行气止痛之功效,川芎嗪是提取于中药川芎的有效成分之一,已被证实对腹腔粘连有一定防治作用。然而川芎嗪作为一种生物碱,具有代谢快、吸收快、半衰期短的特点,导致生物利用度低,限制其临床应用。导师团队针对川芎嗪的代谢特点,利用纳米技术增加药物颗粒溶解度,并结合聚乳酸的覆盖隔离作用研制了川芎嗪纳米喷雾剂新剂型,弥补了川芎嗪的代谢短板。术后腹腔粘连的形成机制尚未完全阐明,多数研究认为与氧化应激、炎症反应、免疫调控失衡和纤溶系统失衡等因素有关,其中氧化应激是腹腔粘连形成的重要环节,实现对术后机体氧化应激的调控可能是防治腹腔粘连的新靶点。转录因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路是重要的内源性抗氧化应激防御机制,其诱导的抗氧化酶对于机体发挥抗氧化作用意义重大,因此深入探讨中药调控Nrf2-ARE信号通路抗腹腔粘连的作用机制,对于明确川芎嗪纳米喷雾剂防治术后腹腔粘连的有效靶点和作用路径具有重要意义。方法:1.川芎嗪纳米喷雾剂防治实验性术后腹腔粘连大鼠药效学研究部分。锉刀法建立大鼠术后腹腔粘连模型,随机数字表法分为假手术组、模型组、川芎嗪纳米喷雾剂组和透明质酸钠组各6只。镜下观察大鼠粘连组织Masson染色情况;采用分光光度计法检测血清超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达水平。2.川芎嗪纳米喷雾剂介导Nrf2-ARE氧化应激通路调控通路关键分子的作用与机制。锉刀法建立大鼠术后腹腔粘连模型,随机数字表法分为假手术组、模型组、川芎嗪纳米喷雾剂组和透明质酸钠组各6只。采用Western blot、Real time PCR技术测定术后腹腔粘连模型大鼠粘连部位细胞核内Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白和mRNA表达水平,采用免疫组化技术观察粘连部位Nrf2蛋白核转位情况。结果:1.与假手术组比较,模型组大鼠血清SOD活力降低,血清MDA、NO及MPO表达水平升高;与模型组比较,川芎嗪纳米喷雾剂组大鼠血清SOD活力升高,血清MDA、NO及MPO表达水平降低。2.川芎嗪纳米喷雾剂可调节纤溶系统因子TIMP-9和MMP-9的表达,抑制粘连形成,并抑制ROS产生,纠正机体氧化应激。3.川芎嗪纳米喷雾剂可促使Nrf2蛋白向细胞核内转位并且激活Nrf2-ARE通路,使其主要蛋白Nrf2、HO-1蛋白和mRNA表达水平升高。结论:1.川芎嗪纳米喷雾剂可通过纠正机体氧化应激、恢复氧化还原系统平衡有效防治术后腹腔粘连,其抗氧化作用的发挥可能与激活Nrf2-ARE信号通路、诱导其抗氧化蛋白表达有关。2.中药在术后康养领域具有广阔的发展前景,根据临床需求探究中药发挥药效的作用机理和有效靶点,对于提高中药的生物利用度和临床靶向性具有重要意义。3.以“治未病”理论为指导,探讨中药及其提取物在术后康养领域的广泛应用有助于从源头杜绝术后各种并发症和继发症的发生,提高患者预后和生活质量。