背景与目的:背景:葡萄糖和脂肪酸是人体主要的能量来源。葡萄糖、脂肪酸的代谢经常相互交织和调节。葡萄糖可以通过从头脂质生物合成途径转化为脂肪酸和胆固醇。过多的脂质分泌在脂蛋白中或储存在脂滴中。葡萄糖和脂质的代谢物在细胞间和细胞内动态运输,然后在特定隔室中转化为其他分子。糖脂代谢紊乱导致心血管疾病、糖尿病和脂肪肝等严重疾病。肝脏在进食和禁食期间在调节全身葡萄糖和脂质代谢方面具有核心作用。通过协调控制进出三羧酸循环（Kerb cycle）的碳水化合物和脂质通量来满足能量要求,该循环受到胰岛素和胰高血糖素的严格调节。在哺乳动物中,5-甲基胞嘧啶（5m C）是DNA修饰的主要形式,在发育和疾病中具有重要作用。哺乳动物基因组中大约60-80%的Cp G位点被5m C修饰。5m C的主要功能包括介导基因组印记、X染色体失活、抑制转座因子和调节转录。5m C在化学和遗传上都是稳定的。DNA甲基化与肝脏代谢关系密切。DNA去甲基化酶（ten-eleven translocation methylcytosine dioxygenases或者ten eleven translocation proteins,TETs）的肝脏表达下调在慢性肝病中极其常见,这导致了全基因组5-m C和5-hm C水平的差异,从而导致了全基因组转录的改变。异常的DNA甲基化造成的基因表达的改变与人类疾病的发病机制有关。然而,目前DNA甲基化变化的刺激因素以及造成DNA甲基化变化的机制并不清楚,而且肝脏内去甲基化酶的作用与功能没有报道。目的:通过肝脏TETs（TET1、TET2、TET3）特异性敲除来探究肝脏DNA甲基化、去甲基化的变化与肝脏代谢的联系。材料与方法:我们在TETsflox/flox小鼠基础上,通过应用AAV-TBG-Cre病毒在肝脏进行特异性TETs敲除,观察小鼠肝脏DNA甲基化的变化,与此同时,观察小鼠肝脏TETs敲除后,机体糖脂代谢的变化,同时观察肝脏病理和肝脏内脂肪和代谢物的变化,并通过基因组内基因表达变化的差异来分析。研究结果:我们应用AAV8-TBG-cre和TETsflox/flox小鼠,建立肝细胞特异性TETs敲除小鼠。AAV8-TBG-cre显著敲低了肝脏内TETs的m RNA和蛋白水平。TETs敲低后,肝细胞5hm C水平降低,DNA损伤标志物表达升高,肝细胞通过碱基切除修复（BER）来弥补TETs的功能以实现去甲基化。TETs敲除小鼠肝脏脂肪沉积增加、脂肪酸氧化降低,肝脏炎症相关表达升高,肝脏内核苷酸、脂肪代谢的中间产物均显著降低,并且改变了肝脏内的代谢物、脂质的成分比例。在机体糖代谢方面,短期TETs敲除后,肝脏的用糖效率增加,但是糖原合成或储备不足,因此到TETs敲除后期,伴随着肝脏大脂滴的形成和炎症的增加,糖耐受（GTT）较野生型变差。结论:1.AAV8-TBG-cre能够有效敲低肝脏内的TETs,并且降低肝脏内5hmC的水平。2.TETs是维持肝脏代谢稳态的关键分子,特别是脂质代谢。3.TETs敲除能够破坏肝细胞DNA的稳定性。