【摘 要】
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细菌人工染色体(BAC)文库比其它基因组文库具有更好的优势,例如容载量大、重组率低、转化效率高,并且在基因鉴定、基因组全序列测定、原位杂交以及比较基因组学等方面的应用
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细菌人工染色体(BAC)文库比其它基因组文库具有更好的优势,例如容载量大、重组率低、转化效率高,并且在基因鉴定、基因组全序列测定、原位杂交以及比较基因组学等方面的应用更高效更稳定。本研究使用由本实验室史雪等人2011年改造的p Indigo BAC536-S载体以及复合载体p HZAUBAC1并参照Luo等人2003年建立的BAC文库构建方法构建BAC文库。该研究主要包含两个部分:1.鲍鱼BAC文库的构建及分析。鲍(Haliotis)是鲍科鲍属的单壳类海洋软体动物。自古以来,鲍就是中国非常珍贵的食材,备受喜爱。为进一步开发鲍鱼的保健及药用价值,在分子生物学水平对鲍鱼进行深入的研究十分有必要。该BAC文库以鲍鱼肌肉组织为材料,文库总计138041个克隆,保存在360块384孔板中,随机挑选了80个鲍鱼BAC克隆检测插入片段,平均插入片段约143 kb,空载率约3.9%,覆盖鲍鱼基因组9.9倍。该文库为深入研究鲍鱼的生理机制以及疾病防控等方面提供了重要材料。2.牡丹BAC文库的构建及分析。牡丹(Paeonia suffruticosa Andrews)是芍药科芍药属植物,其野生种起源于中国,是我国特有的花卉种类,具有良好的观赏价值和药用价值。该BAC文库以牡丹花瓣为材料,总计293433个克隆,保存在765块384孔板中,随机挑选了200个牡丹BAC克隆检测插入片段,平均插入片段约135 kb,空载率约3%,覆盖牡丹基因组2.99倍。该BAC文库为研究牡丹的亲缘关系以及遗传多样性提供有力支持,对深入开展药理学研究提供材料。
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