【摘 要】
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目的评估以生物稳定性聚氨酯(polyurethane PU)为中心支架,应用转化生长因子β1(TGFβ1)促进支架表面残耳软骨细胞生长,制备软骨组织替代物的可行性。内容实验采用弹性聚氨酯
【出 处】
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北京协和医学院(中国医学科学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的评估以生物稳定性聚氨酯(polyurethane PU)为中心支架,应用转化生长因子β1(TGFβ1)促进支架表面残耳软骨细胞生长,制备软骨组织替代物的可行性。内容实验采用弹性聚氨酯(polyurethane PU)材料作为中心支架;以体外扩增获得的残耳软骨细胞作种子细胞;以TGFβ1促进软骨组织生长。将细胞-支架复合后,诱导培育形成软骨组织-支架复合物。方法取残耳软骨组织,胶原酶消化法获得软骨细胞,体外传代培养及生物学特性研究。体外实验将第5代软骨细胞接种于支架表面,实验组使用TGFβ1诱导,分别于第1、2、3周取材进行大体观察,组织学和免疫组化检测。应用2x3析因设计处理湿重数值。体内实验实验组使用含有TGFβ1的完全培养基,对照组使用普通完全培养基,体外培养1周后,接种于裸鼠皮下。分别于第4、8、12周取材进行大体观察,组织学,免疫组化,RT-PCR和扫描电镜检查。使用SPSS16.0统计软件处理湿重数值。结果原代和第1-5代残耳软骨细胞生长旺盛。细胞在聚氨酯支架表面形成软骨组织,向支架内迁移并分泌基质。组织学检测显示基质内有糖胺多糖及Ⅱ型胶原形成,RT-PCR检测到各实验组SOX9、RUNX2、Aggrecan、CollagenX基因表达水平均高于所对应的阳性对照组,扫描电镜显示细胞在支架表面及孔隙内生长。统计显示体内实验中实验组和对照组获得的软骨组织湿重具有显著差异。结论残耳软骨细胞能够形成包裹聚氨酯支架的软骨组织层,TGFβ1有促进与聚氨酯支架复合的软骨组织生长的作用。
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