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MicroRNAs是一类进化上非常保守的小的非编码RNA,在骨骼肌发育中起到了至关重要的调控作用。本实验以巴马香猪为对象,探究miR-208b和miR-499在骨骼肌肌纤维类型转化中的作用,为揭示巴马香猪优良肉质形成机制的研究奠定基础。获得的主要研究结果如下:1.miR-208b和miR-499在巴马香猪背最长肌、股二头肌、心脏中均有高丰度表达,在其他组织中的表达丰度较低。对巴马香猪不同发育时期的背最长肌进行检测,发现miR-208b和miR-499的表达量在胚胎期持续升高,出生后表达量下降。2.巴马香猪背最长肌发育过程中,MyHC Ⅰ的表达量显著性逐渐降低(P<0.05),ⅡA的表达量变化不大(P<0.05),ⅡX的表达量显著性逐渐升高(P<0.05),ⅡB的表达量在E90开始升高。胚胎期氧化型肌纤维标志基因的mRNA所占的比例高于酵解型,表达比例在E40最高,随后下降;成年时期氧化型肌纤维标志基因的mRNA所占的比例低于酵解型。3.巴马香猪胚胎期,AMPK的表达与MyHC Ⅰ的表达呈显著正相关(r=0.9561,P<0.05),PGC-1α的表达与MyHC ⅡB的表达呈显著负相关(r=-0.9410,P<0.05)。4.miR-208b和miR-499的表达量均随着C2C12和小鼠肌肉卫星细胞的分化显著上升(P<0.05)。5.C2C12和小鼠肌肉卫星细胞过表达miR-208b后,肌纤维形态更细长;在分化中后期显著上调MyHC Ⅰ的表达量(P<0.05),显著下调MyHC ⅡB的表达量(P<0.05);分化早中期标志基因MyoG在C2C12及肌肉卫星细胞分化过程中的表达量实验组和对照组无差异(P>0.05);C2C12及肌肉卫星细胞分化过程中,AMPK的表达量实验组和对照组均无显著差异(P>0.05);肌肉卫星细胞中PGC-1α的表达水平显著上调(P<0.05)。6.C2C12和小鼠肌肉卫星细胞过表达miR-499后,肌纤维形态更细长;在分化中后期显著上调MyHCI的表达(P<0.05),显著下调MyHC ⅡB的表达(P<0.05);MyoG基因的表达量实验组和对照组无差异(P>0.05);AMPK、PGC-1α的表达水平均显著上调(P<0.05)。综上所述,miR-208b和miR-499对氧化型肌纤维的形成有促进作用,对酵解型肌纤维有抑制作用,可能通过调控AMPK、PGC-1α起作用。