背景众所周知,动脉粥样硬化是一种发生在动脉内壁的慢性炎症性疾病,其发病机制尚未完全阐明。越来越多的证据表明,血管内皮功能障碍与心血管事件密切相关。因此,正确认识影响血管的收缩和舒张功能的因子失衡,对于了解并干预动脉粥样硬化的发病起重要作用。内皮细胞可以分泌调节因子,包括一氧化氮(NO)和内皮素(ET),从而调节血管松弛和收缩。全反式维甲酸(Retinoic Acid,ATRA)是维生素A的天然衍生物,可通过调节炎症因子来改善动脉粥样硬化。然而,关于全反式维甲酸对动脉内皮功能的作用的研究较少见。本文,我们通过研究在动脉粥样硬化兔中,全反式维甲酸对血管内皮产生的内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平的影响来探讨全反式维甲酸对动脉粥样硬化的作用机制。目的本研究选择普通新西兰白兔作为动物模型,观察全反式维甲酸对动脉粥样硬化兔血管内皮的内皮素-1和一氧化氮的影响,从而探讨全反式维甲酸对动脉粥样硬化的作用机制。方法24只普通新西兰白兔适应性饲养一周后,随机分为三组(n=8):A为正常对照组,B为高脂组,C为ATRA干预组。正常对照组予以普通饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养,ATRA干预组为高脂饲料喂养,高脂饮食4周后,开始加ATRA(10mg/(kg·d))灌胃干预,并继续予以高脂饮食喂养。12周后,采集血标本和胸主动脉标本,观察主动脉斑块形成情况,测定兔的血脂水平、动脉内膜通透性、血液e NOS活性、内皮素(ET-1)、血浆一氧化氮(NO)含量;采用Western blot检测主动脉中ET-1,内皮一氧化氮合酶(e NOS)和e NOS磷酸化的产物(p-e NOS)的水平。结果1.ATRA减轻动脉粥样硬化兔血管内壁斑块形成:油红O染色肉眼可见,正常对照组,血管内壁光滑,基本无斑块形成。高脂组内壁可见明显大面积斑块形成,凹凸不平。ATRA干预组主动脉内壁有斑块形成,与高脂组相比明显较少。HE染色后,光镜下可见正常组动脉壁内膜光滑连续,无内膜增厚,平滑肌细胞排列整齐,弹性纤维稍紊乱。与正常组相比,高脂组动脉壁内膜显著增厚,弹力板多处断裂,可见粥样斑块大量形成,斑块中可见炎性细胞、泡沫细胞。ATRA干预组在药物干预后,其动脉壁内膜可见少量斑块形成,与高脂组相比,脂肪细胞和炎性细胞明显减少。2.ATRA降低动脉粥样硬化兔的血脂水平:由于脂质水平与动脉粥样硬化的进程关系密切,我们检测了各组的胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。与正常组相比较,高脂组的胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白明显增高(P<0.05),高密度脂蛋白降低(P<0.05)。而ATRA干预组的胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均比高脂组减低,高密度脂蛋白较高(P<0.05)。3.ATRA降低动脉粥样硬化兔的动脉内皮通透性:在荧光显微镜下,可以观察到荧光染料在对照组中几乎没有穿透,但渗透高脂组动脉壁的全层,ATRA干预组中荧光染料的穿透率显着低于高脂组,但比对照组增加。4.ATRA影响动脉粥样硬化兔主动脉中ET-1,e NOS和p-e NOS的表达:Western blot结果显示,与对照组相比较,高脂组兔动脉组织中ET-1的表达明显升高,而ATRA干预组的ET-1表达量介于对照组和高脂组之间。此外,关于e NOS磷酸化的产物Ser-1177(p-e NOS)的水平,p-e NOS在高脂组中的表达低于对照组,在用ATRA干预之后,其表达量明显增加。而ATRA的干预对e NOS的表达并无统计学意义。5.ATRA对动脉粥样硬化兔血中e NOS活性和ET-1、NO水平的影响:结果表明,高脂组NO含量显着低于对照组(P<0.05),ATRA处理后eNOS活性和NO含量显着升高(P<0.05)。ET-1的检测结果与NO的水平相反,ATRA组的ET-1表达明显低于高脂组(P<0.05)。结论NO和ET之间的平衡调节是预防和治疗动脉粥样硬化的一个重要途径。在本实验中显示,ATRA可以减少血浆中ET-1的含量,通过增加e NOS磷酸化增加NO含量,并通过调节两者之间的平衡,从而改善血管松弛,减轻动脉粥样硬化斑块形成。它将为未来动脉粥样硬化的临床治疗提供新的方向。