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目的:检测水通道蛋白3(aquaporins-3,AQP3)在胰腺癌组织和胰腺正常组织中的表达及其临床意义,初步探讨表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)通过相关信号通路上调AQP3对胰腺癌细胞增殖和迁移力的影响。方法:取胰腺癌手术切除的组织标本36例,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(Immunohistochemistry)、免疫荧光(immunofluorescence)和免疫印迹方法(Western-blot)检测胰腺组织和胰腺正常组织中AQP3表达与分布情况。在不同浓度和时间条件下观察EGF处理胰腺癌PANC-1细胞系AQP3表达水平,MTT和细胞迁移实验(phagokinetic track motility)测定法分别检测细胞的增殖和迁移能力。结果:通过RT-PCR检测发现,AQP3mRNA在胰腺癌组织表达丰富,胰腺正常组织中无或低水平表达,存在明显差异(两者P<0.05),免疫组织化学结果显示AQP3阳性反应呈棕黄色,主要存在于细胞膜;免疫荧光试验显示同样的结果。通过Western-blot检测进一步证实了RT-PCR的结果。分析胰腺癌组织中AQP3表达量与患者的临床病理特征之间的关系,结果发现低分化腺癌AQP3的表达量明显高于高分化腺癌,与肿瘤的恶性度呈正相关。EGF可诱导表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化,EGF处理后5min,EGFR和ERK的磷酸化达到峰值,EGFR激酶抑制剂(PD153035)和ERK抑制剂(U0126)可阻断EGF诱导的ERK磷酸化;EGF可显著提高细胞中AQP3的活性,并随时间延长活性增强,24h达到较高水平,AQP3活性亦随浓度升高而增强,当EGF浓度为100gg/L时达到较高水平:PD153035、U0126和CuSO4可抑制AQP3的活性以及细胞的移行。结论:AQP3在胰腺癌组织和胰腺正常组织之间存在差异表达;低分化腺癌AQP3的表达量明显高于高分化腺癌,AQP3的表达量与肿瘤的恶性度呈正相关。在胰腺癌PANC-1细胞中,EGF通过磷酸化EGFR,激活ERK,进而使AQP3表达上调,促进PANC-1细胞增殖和迁移。这一通路可被EGFR激酶抑制剂、ERK和AQP3抑制剂阻断,这些涉及的信号通路可能形成潜在的治疗胰腺癌的靶点。