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目的：在外源性抗原刺激下，抗原提呈细胞摄取、加工抗原，并提呈到细胞表面，与主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)形成复合物，识别并结合Th细胞表面相应受体，激活并使其分化成具备不同功能的细胞亚群，其中Th1型细胞主要协助细胞毒性T细胞增强细胞免疫应答，Th2型细胞主要参与体液免疫应答过程。正常情况下，机体内Th1和Th2细胞相互制约，保持相对平衡状态。而在某些疾病状态下，Th1和Th2细胞比例失衡。基于疾病与Th细胞分化之间的关系，调控Th1/Th2平衡显得尤为重要。树突状细胞是功能最强的抗原提呈细胞，通过分泌TNF-α等细胞因子调节T细胞的增殖和活化，调控免疫响应类型，在Th1/Th2平衡中发挥重要作用，同时，抗原表位也是决定后续Th分化的重要因素。碳纳米管是典型的一维纳米材料，具备独特的物理和化学性质，同时易于修饰和功能化，可作为抗原、核酸和药物等的载体。近年来研究显示碳纳米管有可能影响Th1/Th2平衡，促进Th2型细胞的分化，有利于体液免疫应答响应，对细胞免疫应答作用不明显，具体作用机制尚不清楚。因此，进一步研究碳纳米管影响Th分化及其机制，对于推动其在免疫治疗中的应用具有重要的价值和意义。本论文以氧化多壁碳纳米管(CNT)为实验材料，主要开展以下两方面的研究：(1)分析CNT对树突状细胞成熟和活化的影响，研究CNT与OVA抗原不同抗原表位多肽形成的混合物对树突状细胞及后续T细胞免疫响应类型的调控作用。(2)分析CNT对T细胞活化和分化的影响，体外构建Th1/Th2失衡体系，研究CNT对Th1/Th2平衡的影响及机制。 方法：(1)首先利用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向树突状细胞(BMDCs)分化。利用流式细胞仪和瑞士-吉姆萨染色检测树突状细胞表面特征分子CD11c的表达和细胞形态，利用流式细胞仪分析CNT对BMDCs活性的影响;利用透射电子显微镜(TEM)观察BMDCs吞噬CNT情况;通过流式细胞仪和酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测CNT对BMDCs成熟和活化的影响。选用O-2和O-3为模式抗原，利用流式细胞仪检测CNT/抗原复合物刺激的BMDCs表面MHC类分子表达，将CNT/抗原复合物处理的BMDCs与小鼠脾淋巴细胞混合培养，分析CNT/抗原复合物对T细胞增殖和活化的影响。(2)选用人急性T细胞白血病细胞系Jurkat作为T淋巴细胞模型，PMA为Th分化激活剂，探究CNT对Th分化的调控作用及其机制。首先利用CCK-8活性检测试剂分析CNT对Jurkat细胞活性的影响;TEM观察Jurkat细胞摄取CNT情况;实时荧光定量PCR(RT-PCR)和ELISA方法检测CNT/PMA对Jurkat细胞IFN-γ和IL-10表达的影响，分析Th分化情况;RT-PCR方法检测PLC特异性抑制剂U-7对CNT引起的Th分化的影响;蛋白质印迹法(Western Blot)检测CNT/PMA对Jurkat细胞转录因子AP-1和NF-κB磷酸化水平的影响;选用小鼠乳腺癌细胞系4T1作为靶细胞，小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞，研究CNT/PMA诱导脾淋巴细胞体外杀伤4T1细胞的能力。 结果：(1)体外诱导培养得到的细胞中CD11c+细胞比例约为80％，具有典型的树突状形态;低浓度CNT(0.01、0.03mg/mL)不影响细胞活性;CNT能被BMDCs吞噬，但不活化BMDCs。与单独抗原相比，CNT/O-2抗原复合物不影响CD4+T和CD8+T细胞增殖水平;CNT/O-3抗原复合物可明显抑制淋巴细胞分泌抗炎因子IL-4、IL-10和IL-13，提高CD8+T细胞增殖水平，降低CD4+T细胞增殖能力。(2)实验中三个浓度的CNT对Jurkat细胞的活性无明显影响，TEM下观察到有少量CNT粘附到细胞膜上;单独CNT能明显提高胞内钙离子浓度，促进IFN-γmRNA的表达，对IL-10mRNA的表达无影响。CNT/PMA处理的T细胞内可观察到CNT数量增多;与PMA相比，IFN-γmRNA表达增加，IL-10mRNA水平下降;转录因子AP-1的磷酸化水平升高，入核的NF-κB减少，促进细胞向Th1方向分化。U-7能抑制CNT/PMA对IFN-γ产生的促进作用，逆转其对IL-10的抑制作用。CNT/PMA能提高小鼠脾淋巴细胞体外杀伤4T1细胞的能力。 结论：(1)CNT不引起BMDCs的活化，可促进其对抗原的提呈，CNT/O-3抗原复合物可促进淋巴细胞向Th1方向分化。(2)CNT可通过激活Jurkat细胞膜表面PLC，与PMA协同作用，提高转录因子AP-1的磷酸化水平，促进IFN-γ的产生、抑制IL-10的表达，提高Th1型免疫应答水平，增强淋巴细胞介导的杀伤能力。