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白垩病是一种由专性病原真菌蜜蜂球囊菌侵染所产生的蜜蜂幼虫病。球囊菌唯一的侵染途径是以孢子形式经口摄入并在幼虫进入中后肠相通的蛹期这一特殊时期进行侵染。当球囊菌孢子进入蜜蜂体内至完成侵染,以细胞免疫和酚氧化酶为代表的体液免疫在蜜蜂个体免疫中的如何变化是未知的。 本试验利用室内人工饲养意大利蜜蜂幼虫及接种球囊菌孢子技术,探究5日龄初的意大利蜜蜂被接种不同剂量球囊菌孢子(1×107、2.5×107、5×107、1×108孢子数/mL)后的白垩病感染率,发现5×107孢子数/mL有效感染率达到90.00±2.55%。在此基础上对被球囊菌侵染的蜜蜂个体免疫反应进行初步探究,检测了蜜蜂血淋巴中血细胞形态、血细胞总数、黑化反应、酚氧化酶原基因的转录表达相对定量分析。结果显示:血淋巴中未出现明显的细胞免疫行为;接种之后24h内的血细胞总数在接种孢子组和空白对照组之间没有差异;接种孢子组的血淋巴黑化反应出现早并且程度深;蜜蜂体内酚氧化酶原基因转录水平随着个体发育的进行呈上升趋势,接种孢子组蜜蜂体内酚氧化酶原基因转录水平的相对表达量在72h内高于空白对照组,第84h则出现降低,并且远低于空白对照组。 本试验初步探究出了球囊菌侵染对意大利蜜蜂个体免疫反应的影响。球囊菌侵染对被接种球囊菌孢子后蜜蜂的细胞免疫没有明显影响;以酚氧化酶原级联为主的体液免疫则对球囊菌的侵染产生应答,酚氧化酶催化参与的黑化反应加强;酚氧化酶原基因相对表达量先增加后降低的现象则反映了蜜蜂个体免疫与病原侵染间的抗争。本试验为蜜蜂白垩病的防治和抗病育种的选育提供了参考。