地参结合酚对体外肝细胞损伤保护作用的研究

来源 :大理大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:wenjiakui
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目的明确不同产地和不同采收期地参结合酚主要酚类化合物组成;通过体外实验,考察地参结合酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用,并对其保护机制进行初步探讨,为进一步揭示地参结合酚的功能活性和地参的开发与利用提供实验基础和理论依据。方法采用碱提法提取地参结合酚,并采用X-5大孔树脂进行纯化,福林-酚法测定酚含量;采用高效液相色谱(HPLC)法对地参结合酚的组成进行分析;采用体外CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤模型,通过检测肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH),炎症反应因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)含量,以及细胞凋亡和Caspase-3活性,探讨地参结合酚对体外CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制。结果地参结合酚的酚含量范围为155.55~164.95μg GAE/mg EDW。单体组成的分析结果表明,地参结合酚中主要酚类化合物单体为咖啡酸(40.67~72.18μg/mg EDW);采收期对咖啡酸和迷迭香酸在地参结合酚中含量的影响不同。细胞毒性实验结果显示,地参结合酚在0.2~1.6 mg/mL浓度范围内,对BRL大鼠肝细胞增殖活性无影响;在CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤保护体系中,地参结合酚浓度范围为0.2~1.6 mg/mL时,细胞存活率为43.75~72.82%,且随着浓度的增加细胞存活率逐渐升高;在0.4~1.6 mg/mL浓度范围,与模型组相比,地参结合酚可以显著抑制CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤时ALT、AST、LDH含量的升高(p<0.05),降低炎症反应因子TNF-α、IL-6、IL-8的含量,并抑制细胞凋亡和Caspase-3活化(p<0.05)。结论采收期对地参结合酚酚含量及主要酚类化合物组成的影响不同;地参结合酚中的主要酚类化合物单体为咖啡酸;地参结合酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤有显著的保护作用,且呈现剂量效应关系。地参结合酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的保护机制与抑制炎症反应、细胞凋亡和阻滞Caspase-3活化有关。
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