AD是一种以获得性进行性记忆减退、认知功能障碍以及行为异常为特征的神经退行性疾病.其三大病理特征是:老年斑(SP)、神经元纤维缠结(NFT)和神经元数目的减少.β-淀粉样蛋白(Aβ)是构成SP的核心成分,也是NFT的生化基础<[1]>,对神经细胞有直接的毒性作用,但致神经细胞凋亡和坏死的百分比,目前研究的还不十分清楚.NGF作为一种神经营养因子,能否抑制AD的神经元变性仍存在争议.目的:研究Aβ对体外培养海马神经细胞的毒性作用,及NGF对Aβ诱导的海马神经细胞凋亡的保护作用.方法:1、取新生1天SD大鼠的海马区,应用一般培养法、加阿糖胞苷法、加阿糖胞苷和神经生长因子法培养神经元,进行神经元形态的观察,用倒置显微镜观察法和MTT比色分析检测神经元存活率,并用ABC免疫组化反应法比较三种不同培养方法在不同培养时间所得神经元的纯度.2、观察不同浓度、不同时间Aβ<,1-40>对体外培养的海马神经细胞的毒性,并用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、荧光染色进行细胞凋亡和坏死的检测.3、对体外原代培养的海马神经细胞通过透射电镜、琼脂糖凝透胶电泳、原位末端标记(TUNEL)等方法观察加Aβ组、加Aβ及NGF组神经细胞的凋亡情况.结论:1、NGF对培养的神经细胞具有营养和支持作用;2、一定浓度的Aβ对体外培养的海马神经细胞具有细胞毒性,由其诱导的神经细胞凋亡和坏死具有时间和剂量效应;3、NGF对Aβ诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用.