L-氨基酸氧化酶（LAAO;EC 1.4.3.2）通常为二聚体黄素蛋白酶,具有抗菌等生物学特性,可作为动物防御攻击的武器,可帮助藻类从不同氨基酸中获得氮源。目前,LAAO可用于过氧化氢原位生产工艺中,及作为生物传感器或用于生物转化,制备治疗肿瘤、艾滋病药物中。本论文对海洋微生物来源的LAAO进行了研究。通过测定a-酮酸、H₂O₂、NH₄⁺确定海洋源细菌B3具有产LAAO能力;通过单因素试验得到B3最适培养基为3号培养基,最适培养温度为30℃,最佳摇床转速为140 r/min,最佳培养时间为72 h;通过正交试验优化,确定4个因素的最优组合为A1B1C2D2,即接种量2%、菌龄24 h、装液量40 mL、发酵初始pH 7.5。通过16S rDNA分子生物学分析,发现菌株B3与Pseudoalteromonas viridis的相似性为98.5%。结合菌株B3形态特征、生长特性、生理生化特性的研究,将B3确定为Pseudoalteromonas sp.,命名为Pseudoalteromonas sp.B3。将B3发酵粗酶液逐步通过硫酸铵分级盐析、Hiprep₂6/10_Desalting脱盐、阴离子交换层析、苯基疏水层析、S200凝胶过滤最终得到较纯的LAAO,并对其酶学性质进行研究,表明其pH稳定范围为4～8,最适反应pH值为7;具有良好的热稳定性,最适反应温度为30℃;Zn²⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、K⁺和Ge²⁺对该酶有促进作用,其中以Zn²⁺、Ca²⁺促进作用最大;Mn²⁺、Cu²⁺、Co²⁺、Fe²⁺和Ba²⁺对该酶有抑制作用,其中以Fe²⁺、Ba²⁺抑制作用最大;能以试验中的11种L-氨基酸作为底物,以L-Leu为底物时其酶活最高,是一种底物广谱性LAAO。将降落PCR、巢氏PCR扩增得到的4段序列进行拼接后得到2008 bp的一段序列,该序列包括1608 bp开放阅读框,编码535个氨基酸,包含黄素蛋白保守区R-x-G-G;其推导的成熟蛋白分子量为59571.46 Da,理论等电点为6.11;氨基酸组成分析表明丙氨酸含量最高9.91%,其次亮氨酸含量为9.53%;其一级结构中没有容易断裂的位点形成信号肽;其二级结构主要由三种二级结构单元组成,含有224个α-螺旋,72个延伸链和239个随机卷曲,其中随机卷曲的含量最高为44.67%。