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柞蚕(Antheraea pernyi)是我国一种重要的经济昆虫,也是一种重要的基础生命科学研究对象。在野外生长的柞蚕遭受着各种病害的侵袭,其中柞蚕吐白水病是一种危害严重的病毒病,它给我国的柞蚕饲养业造成了巨大的经济损失。本研究发现了一株新的柞蚕小RNA病毒,通过病毒注射试验,证明了该病毒是柞蚕吐白水病的病原生物,这将对柞蚕吐白水病的诊断与防治产生重要的影响。本文的主要内容和研究结论如下：(1)通过蔗糖密度梯度离心,在患得吐白水病的柞蚕幼虫、柞蚕蛹体内分离得到了一株新的正义单链RNA病毒。被该病毒侵染健康柞蚕幼虫,会表现出明显的柞蚕吐白水病的症状。因此根据柯赫氏法则,推断该病毒为柞蚕吐白水病的病原生物。(2)验证了柞蚕Iflavirus病毒的基因组含有10163个核苷酸,具有两段非编码区、一个开放性阅读框以及一个天然的poly-A尾巴。该病毒的开放性阅读框能够编码一条含有3036个氨基酸的多聚肽链,四个病毒蛋白位于肽链的N端(Viral protein1-4),三个功能蛋白位于肽链的C端(其中包括含有解旋酶结构域的2C蛋白、含有半胱氨酸蛋白酶结构域的3C蛋白和含有RNA依赖性的RNA合成酶结构域3D蛋白)。对该病毒基因组结构、氨基酸序列和进化树的分析结果都表明,这个病毒是Iflavirus病毒属的一株新生物,因此将其命名为柞蚕Iflavirus病毒(Antheraea pernyi Iflavirus, ApIV)。(3)利用Bac-to-Bac表达系统,在Sf9细胞内表达了带有组氨酸标签的柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白,经过亲和层析的方法纯化后,得到了大量的、高纯度的重组蛋白。经实验检测,柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白具有NTPase活性,能够水解ATP/UTP/CTP/GTP,释放磷酸根离子,对四种NTPs的水解能力由高至低依次为ATP>GTP>UTP>CTP。柞蚕Iflavirus病毒解旋酶的最适反应体系为50mM Tris-HCl(pH8.0),2mM MgCl2,50mM NaCl,1mM ATP,反应温度为37℃。柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白具有DNA解旋酶活性,能够以DNA-DNA双链为底物发生解旋反应,解旋方向为3’到5’方向。(4)进行了柞蚕幼虫、蛹、蛾的实验室感染试验,并使用RT-PCR、Western Blot等方法检测了柞蚕Iflavirus病毒在昆虫体内及受精卵中的复制情况。实验证明,在经口接种或注射接种柞蚕Iflavirus病毒的幼虫、蛹、蛾体内,可以明显的检测到该病毒的生长复制,能够被感染的柞蚕组织包括脑、表皮、血淋巴、中肠、脂肪体以及卵巢和精巢等。当柞蚕Iflavirus病毒感染了雌蛾后,可以通过母体介导的方式,传递给子代。因此柞蚕Iflavirus病毒在昆虫群体中具有着水平传播、垂直传播的传播方式。