促甲状腺素受体(TSHR)是一种糖蛋白受体,属于G蛋白偶联受体家族,广泛存在于脊椎动物,尤其是哺乳动物中。在动物体内,TSHR与促甲状腺素(TSH)特异结合,参与细胞的信号转导作用。文昌鱼(Amphioxus)是介于无脊椎动物和脊椎动物之间的过渡类型,是研究脊椎动物进化的珍贵材料。本文从青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtaunese)总RNA中,克隆了Tshr基因并对其基因表达、进化及其融合蛋白表达进行了研究。本文利用RT-PCR和RACE方法克隆了青岛文昌鱼Tshr基因。青岛文昌鱼Tshr基因的cDNA序列长为1825bp,5’端非翻译区有154个碱基,3’端非翻译区为295个碱基,含有一个poly(A)尾,最大开放阅读框(ORF)为1377bp,编码一个由459个氨基酸组成的多肽链,其分子量大约为50kDa。通过MegAlign比对,发现文昌鱼TSHR蛋白与其它物种TSHR蛋白相似性为30～40%之间;在进化树中文昌鱼TSHR蛋白也处于脊椎动物和无脊椎动物之间,说明文昌鱼的TSHR还是处于一种较为原始的状态。切片原位杂交显示,文昌鱼Tshr基因在成体的内柱位置特异表达,证明内柱与脊椎动物甲状腺进化的同源性。对胚胎的原位杂交和实时定量结果表明,文昌鱼Tshr基因在胚胎和成体中的功能可能有所差异。利用原核表达系统表达了文昌鱼TSHR蛋白,获得了分子量约为50kDa的蛋白。使用成品TSHR多克隆抗体进行Western blot,结果表明抗体能与我们表达的蛋白特异性杂交。