笃斯越桔组培快繁、植株再生及耐弱碱突变体的筛选

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笃斯越桔自然分布于我国东北的大、小兴安岭及长白山林区,有较高的观赏价值和药用价值,但笃斯越桔是酸性植物、野生资源有限、果小采摘困难,满足不了市场需要。本研究以笃斯越桔休眠枝为试材,研究其组培快繁及再生技术体系,在此基础上建立离体材料适宜的EMS诱变方法,进行耐碱突变体筛选,为种质资源的保护、利用和创新奠定基础,试验得到如下结果:  1、笃斯越桔的初代培养基为WPM+ZT2.0mg·L-1;增殖培养基为改良MS+ZT0.5mg·L-1+IBA0.2mg·L-1,pH值为4.2,增值倍数达到5.9;适宜的生根培养基为1/4改良MS+IBA0.5mg·L-1,添加活性炭2 g·L-1,生根率达94%;练苗移栽较好的方法是将组培苗在纯沙子中催根20天,再移栽至草炭土:腐殖土为1:2的基质中,成活率达到78%;  2、改良MS+ZT2.0mg·L-1+IBA0.3 mg·L-1暗培养14d较适合笃斯越桔叶片再生,平均再生频率达到78%、平均再生芽数达到12.6;叶片为外植体再生不定芽效果好于叶柄和茎段;  3、0.4% EMS浸泡笃斯越桔茎段4h为适宜的处理方法,存活率达46.7%,平均增殖系数为3.6;笃斯越桔茎段经含0.1%EMS的培养基处理3天,存活率为50%,平均增殖系数为1.8;  4、笃斯越桔组培苗耐NaHCO3突变体适宜的剂量为8 mmg·L-1,将EMS处理达到半致死剂量的试管苗接种在耐 NaHCO3突变体的适宜剂量培养基中,通过耐盐培养基和普通继代培养基中交替培养3次,筛选出2株候选耐碱突变体。
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