【摘 要】
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目的:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术分析儿童非何杰金淋巴瘤患儿外周血APRIL及其受体mRNA表达水平。 方法:在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检
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目的:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术分析儿童非何杰金淋巴瘤患儿外周血APRIL及其受体mRNA表达水平。
方法:在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因APRIL、BCMA和TACI的水平并以靶基因和内参p2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。对22例非何杰金淋巴瘤患者外周血单个核细胞以及淋巴瘤细胞株APRIL及其受体mRNA表达水平进行定量测定。
结果:(1).RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109pg/ml~101pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数v分别为1.81%-5.97%和6.40%-10.58%。(2).22例儿童非何杰金淋巴瘤样本的APRIL及其受体BCMA和TACImRNA水平的表达水平均显著高于正常儿童(p<0.05)。(3).淋巴瘤细胞株Raji细胞、T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞和髓系白血病U937细胞株中APRIL表达有差异。
结论:RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL及其受体在儿童非何杰金淋巴瘤明显增高,提示APRIL在儿童非何杰金淋巴瘤的发病机制中可能起一定的作用;APR工L可能对儿童淋巴结肿大性疾病有早期鉴别诊断的价值作用。
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