随着社会的进步以及经济的发展,人们对于奶产品的需求量日益增大,与此同时奶业成为现代农业中举足轻重的产业。牛奶作为日常生活中重要的蛋白质来源,以其丰富的营养含量以及易于大众接受的风味和价格,受到广大人民群众的喜爱。同时,以牛奶为基础衍生出不同风味的食品,例如酸奶、奶酪等,更是将牛奶的营养价值最大化。牛奶中乳脂乳蛋白作为重要的营养物质,是奶业的核心竞争力的标志,也是评价牛奶品质的重要指标之一。如今关于如何提高牛奶中乳脂和乳蛋白的含量已经成为国内外研究的热点。已有研究表明,大部分乳蛋白是由乳腺上皮细胞来合成,乳脂合成大部分是由饲料中营养物质的转入或者在乳腺上皮细胞中进行脂肪酸从头合成。目前,在奶牛饲料中,提高乳脂含量可以通过添加功能性油脂来实现。功能性油脂如大豆油,已经普遍用于奶牛日常饲养中。研究者已知油茶籽油也是一种含多种营养物质的功能性油脂,但截至目前为止,油茶籽油对于奶牛乳合成的影响研究却鲜有报道。因此,本研究基于奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)为细胞模型,探究额外添加油茶籽油对乳腺上皮细胞中乳脂以及乳蛋白合成相关基因的表达影响。将牛乳腺上皮细胞(MAC-T)复苏,以1×105个/ml的密度接种于培养皿,待其贴壁生长至培养皿的90%以上时,进行油脂添加试验。添加量为试验组添加150μg/ml的油茶籽油工作液,对照组添加150μg/ml的大豆油工作液。油茶籽油对牛乳腺上皮细胞内脂肪酸组成的影响结果表明,油茶籽油改变了MAC-T细胞中脂肪酸的组成。与对照组相比,添加油茶籽油后MAC-T细胞中油酸(C18:1)提高了29.26%,棕榈酸(C16:0)提高了23.51%,亚油酸(C18:2c,ω-6)提高了13.69%,二十碳三烯酸(C20:3c,ω-6)提高了14.71%,但是均无显著差异。癸酸(C10:0)、十一酸盐(C11:0)、月桂酸(C12:0)、肉豆蔻酸(C14:0)、十五烷酸(C15:0)、棕榈油酸(C16:1)、硬脂酸(C18:0)以及芥酸(C22:1)尽管高于对照组,但无显著差异。但是己酸(C6:0)下调且无显著差异。此外,脂肪酸组成的综合分析,与对照组相比,添加油茶籽油后MAC-T细胞中长链脂肪酸(LCFA)的比例提高了21.48%,然而中链脂肪酸(MCFA)的比例降低了25.69%,均无显著差异。单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)的比例尽管高于对照组,但均无显著差异。而饱和脂肪酸(SFAs)的比例低于对照组且无显著差异。MUFA/SFA比值以及PUFA/SFA比值尽管高于对照组,但无显著差异。另一方面,ω-6不饱和脂肪酸比例提高了13.92%,但均无显著差异。与对照组相比,添加油茶籽油后MAC-T细胞中去不饱和指数C18:1/(C18:0+C18:1)显著上调(P<0.05),但C16:1/(C16:0+C16:1)的比例降低了20%且无显著差异。油茶籽油对奶牛乳腺上皮细胞乳脂及其相关基因表达的影响结果表明,乳脂信号通路相关基因检测其中包含SREBP1(固醇调节元件结合蛋白)及PPARγ(过氧化物酶体增殖物激活受体γ),脂肪酸从头合成相关信号通路FASN(复合同二聚体酶)、ACC(脂肪酸合成途径中高度调控酶)、LPL(脂肪酸转运相关基因)、SCD(乳腺中合成单不饱和脂肪酸的关键酶)。与对照组相比,在MAC-T中添加油茶籽油后,促进SREBP1的表达以及脂肪酸从头合成相关基因ACC、FASN、LPL和SCD的表达(P<0.05),但是对于PPAR-γ并无影响。油茶籽油对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成及其相关基因表达的影响结果表明,与对照组相比,添加油茶籽油能够促进MAC-T中的β-酪蛋白在m RNA水平的表达,同时抑制αS1-酪蛋白基因的表达(P<0.05)。与对照组相比,添加油茶籽油,促进m TOR上游基因PI3K和AKT1的基因表达(P<0.05)以及m TOR下游基因S6K1的表达(P<0.05),但是抑制m TOR下游基因e IF4E的表达。与对照组相比,添加油茶籽油,对酪蛋白基因表达的另一条经典信号通路JAK2/STAT5也有积极影响,促进JAK2、STAT5-β以及ELF5基因的表达(P<0.05);另一方面,在蛋白水平的试验中,与对照组相比,添加油茶籽油能够积极促进m TOR、S6K1以及STAT5-β的蛋白表达(P<0.05)。在磷酸化水平的试验中,与对照组相比,添加油茶籽油后结果显示m TOR、S6K1以及STAT5-β蛋白磷酸化加强(P<0.05)。说明添加油茶籽油后,激活了PI3K/AKT/m TOR以及JAK2/STAT5两条信号通路。总之,添加油茶籽油后,可以促进MAC-T细胞中的SREBP1以及脂肪酸从头合成相关信号通路的表达,并且通过调控PI3K/AKT/m TOR和JAK2/STAT5信号通路共同促进β-酪蛋白基因表达。