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目的1.在组织水平,主要研究B23在胶质瘤样本中的表达情况,同时分析B23与增殖指标Ki-67及临床病理特征的相关性,探讨B23与胶质瘤发生发展及预后的关系。2.在细胞水平,研究B23在胶质瘤细胞增殖中的影响,并探讨B23参与胶质瘤细胞生长调控的机制,为胶质瘤的治疗提供新的靶点。方法1.在组织水平,采用Western blot技术检测各级胶质瘤组织中B23的表达情况;采用免疫组化方法检测90例组织石蜡切片中B23的表达情况,并结合胶质瘤临床病理资料分析B23与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤发生部位、手术切除范围、肿瘤直径和WHO分级等因素之间的关系,Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者生存率,采用Cox回归模型进行单因素和多因素分析B23与胶质瘤预后的关系。2.在细胞水平,用Western blot检测胶质瘤各细胞株中B23的表达情况,筛选出表达较高的胶质瘤细胞株(U87MG和U251MG)。胶质瘤细胞经血清饥饿释放同步化分析和流式细胞仪分析检测细胞周期。在U87MG和U251MG细胞中,干扰B23表达后分别用Western blot检测B23、CyclinD1和PCNA的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期的变化,CCK8实验检测胶质瘤细胞增殖情况。结果1.Western blot和免疫组化分析显示,B23的阳性表达与胶质瘤患者的病理分级相关,且胶质瘤病理分级越高,B23的阳性率越高(P=0.013),但与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤发生部位、手术切除范围、肿瘤直径等无关(P>0.05)。相关性分析提示B23的表达与Ki-67表达呈正相关。Kaplan-Meier分析显示B23低表达组患者的五年生存率明显高于B23高表达组的患者(P=0.004)。Cox回归模型单因素及多因素分析表明B23、Ki-67可做为提示胶质瘤预后的独立指标(P<0.05)。2.用Western blot检测胶质瘤各细胞株中B23的表达情况,其中表达水平较高的为:U87MG,U251MG。通过血清饥饿释放分析发现随着血清释放刺激胶质瘤细胞的增殖,B23表达增加,并伴随着细胞周期相关蛋白PCNA、CyclinA的表达增加。在U87MG、U251MG细胞中,干扰B23表达后,细胞周期蛋白PCNA和CyclinD1的表达水平降低,细胞分裂停滞,CCK8试验也显示细胞增殖被抑制。结论1.B23在胶质瘤组织中高表达,且与肿瘤级别正相关,与胶质瘤患者的不良预后有密切关系,提示B23可能与胶质瘤的发生发展密切相关,可作为判断胶质瘤预后的指标之一。2.B23可能是通过影响肿瘤细胞周期而影响胶质瘤细胞的存活。干扰B23表达使胶质瘤细胞增殖明显受抑,因此B23可能成为胶质瘤潜在的治疗靶点。