稻瘟病菌两个假定的Rho GTP酶激活蛋白的功能研究

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Rho GTP酶,通过在GTP结合激活态与GDP结合失活态之间的转换,在调控细胞活动中起着分子开关的作用。Rho GTP酶激活蛋白(RhoGAP)作为调控因子,能够激活Rho GTP结合蛋白内在的GTP酶活性,使其加速水解成GDP失活态。在真菌中,RhoGAP参与调控细胞骨架的重组和细胞极性生长,在细胞形态建成中发挥着关键作用。稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)是研究丝状真菌的重要模式生物。该菌的侵染循环涉及复杂的细胞分化过程,以应对宿主的防卫机制。我们推测RhoGAP在这一过程中起到调控作用。稻瘟病菌数据库分析表明,稻瘟病菌中有8个假定的RhoGAP蛋白,它们均有保守的RhoGAP结构域。本研究对其中两个假定的RhoGAP蛋白MgLrg1和MgRga1进行了功能分析。我们通过同源重组的方法构建了MgLRG1和MgRGA1的敲除突变体。对敲除突变体的表型进行分析后发现:Mglrg1敲除突变体菌丝生长速度明显减慢,菌丝末端分枝增多;分生孢子形态正常,但产孢量显著减少,孢子无法分化出正常的附着胞且丧失了致病性。Mgrga1敲除突变体分生孢子形态异常,产孢量略微下降;在疏水表面上附着胞形成严重滞后,但不影响菌丝的生长发育和致病性。这些结果表明了MgLrg1对于稻瘟病菌的细胞分化、极性生长和侵染致病是必需的;已证实MgRga1与MgCdc42可直接互作,因此MgRga1可能通过调节Cdc42的活性,在细胞极性生长过程中起着重要作用。
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