基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法用于检测阿维菌素

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随着人们的生活不断的提升,人们对于的生活的质量的要求也不断提高,特别对于的食品安全的要求尤其在意。阿维菌素作为一个农用兽用药,是目前为止使用的最广泛的农兽药之一,在食品中存在残留的可能性。因而建立一种快速有效检测阿维菌素的方法密切关注。本实验是利用修饰阿维菌素使之偶联蛋白质去免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,在获得多克隆抗体的基础上,结合介孔二氧化硅包裹的正电荷纳米金建立了对样品中阿维菌素的残留的检测。首先采用化学合成方法修饰阿维菌素分子使之更容易偶联蛋白,接着采用碳二亚胺法将其与大分子蛋白牛血清蛋白和卵清蛋白偶联作为免疫抗原和包被抗原。经红外光谱验证阿维菌素修饰物合成,经过紫外吸收和SDS-PAGE鉴定阿维菌素的免疫抗原和包被抗原的合成。接着用免疫抗原去免疫新西兰大白兔的得到多克隆抗体。通过化学合成合成正电荷纳米材料,同时由于纳米金带着正电荷的原因容易聚集沉淀,所以在这个基础上本人添加介孔二氧化硅作为载体,能够有效的使纳米材料更好地分离和活性物质更好地暴露。通过扫描电镜,透射电镜,元素映射,N2吸附-脱附,X射线衍射,能量色散X射线和Zeta电位仪等方法验证纳米材料的成功合成。通过建立基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法对于食品中阿维菌素残留的检测。在优化的优化条件下,构建了基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法和酶联免疫方法检测阿维菌素的标准曲线。对于酶联免疫方法来说,IC50值为56.29ng/m L,LOD为6.14 ng/m L,线性范围范围为7.68–412.49 ng/m L,基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法来说,IC50值为21.61 ng/m L,LOD为2.17 ng/m L,线性范围为2.53–184.28 ng/m L。结果表明,基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法比酶联免疫方法更为灵敏。特异性实验和加样回收实验证明了此方法有高的特异性和高回收率,而且和高效液相相比,此方法有高的准确性,总的来说,开发的基于介孔二氧化硅的正电荷纳米金免疫分析法被证明是检测动物组织中阿维菌素的有效方法。
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