不同CpG在鸡体内增强新城疫灭活苗诱导体液免疫效力的比较

来源 :中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Yeah12345678
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未甲基化的CpG寡核苷酸(CpG-ODN)对哺乳动物的免疫细胞具有刺激作用,是蛋白质和DNA疫苗的理想佐剂。本实验研究了CpG-ODN在鸡体内对NDV灭活苗的免疫增强效果,初步探讨它在家禽中作为免疫增强剂的可能性。 我们合成了经硫代修饰的两种不同序列的CpG-ODN和不含CpG的寡核苷酸(non-CpG-ODN),动物实验分四组进行,各种ODN的使用剂量均为100μg/只,肌肉免疫后每周采一次血,用间接ELISA检测特异性抗体。结果表明,两种CpG-ODN对NDV灭活苗均具有很强的免疫增强作用,它们之间的免疫增强效果没有显著差别(P>0.05);non-CpG-ODN对.NDV灭活苗的体液免疫不具有明显的增强作用(P>0.05)。 合成其中一种CpG-ODN及其互补链,并制备成双链CpG-DNA单体。采用质粒重组和PCR方法,将其串联成长为600多碱基对的DNA(P-CpG-DNA),其中含有62个CpG基序,并将其中一部分用Sall酶切得到含两个CpG-DNA单体的CpG-DNA2。动物实验表明,CpG-DNA2对NDV灭活苗的体液免疫均没有免疫增强功能,P-CpG-DNA具有明显的抑制作用(P<0.05)。免疫后流式细胞仪分析结果显示,在鸡体内,CpG-ODN对CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖具有较弱的刺激作用,P-CpG-DNA对它们的增殖具有抑制作用,这一结果与它们对NDV体液免疫的影响一致。 本研究表明,CpG-ODN能增强家禽的免疫系统对抗原的体液免疫应答,短链CpG-DNA没有明显的增强功能,而CpG基序含量高的长链CpG-DNA反而有抑制作用。这些结果为我们进一步研究CpG在家禽的应用奠定了基础。
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