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目的:以腺病毒为载体,将人转化生长因子β1基因转染至自体腘绳肌腱并重建兔前交叉韧带,检测术后不同时段目的基因的表达水平。方法:以DMEM培养液稀释重组腺病毒载体(Ad-hTGFβ1)及腺病毒空载体(Ad-GFP),使病毒的滴度为5×108PFU/ml。取新西兰兔48只,平均18月龄,体重2.0±0.4 kg,随机分为A、B、C 3组(n=16)。将兔的双侧后膝关节作为研究对象,取自体腘绳肌腱重建同侧ACL,重建前A、B两组腘绳肌腱分别以Ad-hTGFβ1及Ad-GFP培养12h,C组作为对照组以空白的DMEM培养。12h后应用荧光显微镜观察A、B两组腘绳肌腱中绿色荧光蛋白的表达,ELISA检测A组腘绳肌腱中hTGFβ1蛋白的表达。在ACL重建术后2、4、6、8周,每组各处死4只实验动物并取材,应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹技术对各组腘绳肌腱中hTGFβ1基因的表达产物进行检测。结果:1.腺病毒载体转染腘绳肌腱的结果荧光显微镜观察结果显示:A、B两组腺病毒载体转染腘绳肌腱12h后均可见绿色荧光蛋白表达,其表达无明显差异。ELISA结果显示:A组腘绳肌腱中hTGFβ1蛋白的表达量为221±12.2 ng/mL。2.标本大体观察术后2、4、6、8周分批将3组实验动物各处死4只,取双侧膝关节进行大体观察,膝关节周围无红肿及发热,切口愈合良好,无感染迹象,关节腔内可见滑膜明显增生,半月板未见明显磨损及破裂,移植肌腱固定牢靠,张力良好,术后2周时可见移植腱与胫骨、股骨隧道间仍有间隙,4周时可见骨隧道内口有部分瘢痕组织填充,6周时可见骨隧道内口瘢痕组织填充较前增多,8周时骨隧道内口可见大量瘢痕组织填充,外口见部分骨样组织生长。3.实时荧光定量PCRB、C两组在术后各时间段未能检测到hTGFβ1 m RNA的表达,而A组可检测到其表达,A组hTGFβ1 m RNA的表达在重建术后2周较强,随时间的推移其表达逐渐降低,可持续至术后第8周,差异具有显著性(P<0.05)。4.蛋白印迹检测A组TGFβ1蛋白在各时间段的相对表达量均高于B、C组,差异具有显著性(P<0.05)。其表达在第2周时较强,随时间推移而逐渐减弱,可持续至术后第8周,差异具有显著性(P<0.05)。结论:在腺病毒载体介导下,hTGFβ1基因能成功转染至腘绳肌腱并能在ACL重建术后有效表达。