【摘 要】
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目的:探讨加味香砂六君子汤诱导胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡作用的可能性,并阐述其发生机理,为临床使用加味香砂六君子汤治疗胃癌提供实验室依据。方法:本论文采用体外培养技术
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目的:探讨加味香砂六君子汤诱导胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡作用的可能性,并阐述其发生机理,为临床使用加味香砂六君子汤治疗胃癌提供实验室依据。方法:本论文采用体外培养技术,将加味香砂六君子汤按1.55g/kg、3.1g/kg、6.3g/kg的剂量分为实验低、中、高组,50umol/l的5-Fu设为5-Fu观察组,并同时设立空白对照组,将以上试剂分别作用于处于对数生长期的胃癌细胞株SGC-7901,48h后收集样本。通过流式细胞仪分析检测胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡周期,相同样本重复三次试验;使用免疫细胞化学法检测经加味香砂六君子汤作用后的胃癌细胞株SGC-7901 Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平,相同样本重复三次试验;采用SPSS 23.0软件对数据进行分析。各组细胞不同细胞周期细胞百分率及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平均用(?)±S表示,多组间样本均数比较采用单因素方差分析。结果:1.空白对照组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组、5-Fu组G1期比率分别为:89.34±1.42,87.80±1.93,84.06±2.52,82.87±1.71,82.11±2.76。S期比率分别为:8.36±0.65,7.75±0.80,7.46±1.55,6.31±1.51,6.11±2.09。G2期比率分别为:2.09±1.07,4.45±1.69,8.49±2.03,10.83±2.46,11.79±2.24。2.Bcl-2经染色后对照组的细胞,细胞中棕黄色颗粒明显增多,大部分细胞表达强阳性。经不同浓度加味香砂六君子处理SGC-7901细胞后,Bcl-2蛋白的阳性表达率随着药物剂量的提高和作用时间的延长而减少,强阳性染色的细胞比例逐渐减少。Bax经染色后对照组的细胞,细胞中棕黄色颗粒数目较少,大部分细胞表达弱阳性。经不同浓度加味香砂六君子汤处理SGC-7901细胞后,Bax蛋白的阳性表达率随着药物剂量的提高和作用时间的延长而增加,强阳性染色的细胞比例显著增多。Caspase-3经染色后对照组的细胞,细胞中棕黄色颗粒数目较少,大部分细胞表达弱阳性。经不同浓度加味香砂六君子汤处理SGC-7901细胞后,Caspase-3蛋白的阳性表达率随着药物剂量的提高和作用时间的延长而增加,强阳性染色的细胞比例显著增多。3.低浓度中药组处理后的Bcl-2蛋白表达低于中浓度组和高浓度组(p<0.05)。高浓度中药组处理后Bax蛋白表达高于低浓度组和中浓度组(p<0.05)。高浓度中药组处理后Caspase-3蛋白表达高于低浓度组和中浓度组(p<0.05)。结论:1.加味香砂六君子汤可阻滞SGC-7901细胞在G2期并诱导其凋亡。2.经过不同浓度的加味香砂六君子汤作用,观察细胞SGC-7901的蛋白表达,其中Bcl-2阳性表达率随着剂量和时间的增加而减少,Bax和Caspase-3的阳性表达率随着剂量和时间的增加而增加。3.高浓度的加味香砂六君子汤对胃癌SGC-7901的细胞蛋白Bax及Caspase-3作用明显优于低、中浓度。而低浓度的加味香砂六君子汤对胃癌SGC-7901的细胞蛋白Bcl-2作用明显优于中、高浓度。4.加味香砂六君子汤下调Bcl-2的表达,上调Bax及Caspase-3的表达可能与细胞凋亡有关。
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