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背景巨噬细胞移动抑制因子（Macrophage Migration Inhibitory Factor , MIF）具有信号调节、免疫活性、促进炎症反应、催化功能以及内分泌功能等多种生物学功能。它还可以刺激细胞增殖、分化、迁移，促进肿瘤血管生成，在肿瘤的发生、发展和转移中担任重要角色。MIFsiRNA（the small interfering RNA of macrophage migration inhibitory factor）是一种化学合成的MIF的特异性siRNA，它能够与MIF的mRNA同源序列特异性的结合，导致MIF的mRNA序列分解，MIF蛋白的翻译受到抑制，从而抑制MIF的生物学功能。因此，我们推测MIFsiRNA可以抑制大肠癌细胞的增殖、侵袭，增加细胞的凋亡。目的研究化学合成的MIFsiRNA对大肠癌细胞生物学行为的影响，并探讨其可能的机制，为防治大肠癌开辟新的途径。方法1、荧光的实验组用100 nM/ml浓度的FAMsiRNA转染大肠癌细胞，空白对照组不添加任何siRNA进行处理。2、阳性对照组用10～100 nM/ml浓度的MIFsiRNA转染大肠癌细胞，阴性对照组用10～100 nM/ml非特异性的siRNA转染大肠癌细胞，空白对照组不添加任何siRNA进行处理。3、RT-PCR检测MIFsiRNA组、非特异性的siRNA组和空白对照组转染大肠癌细胞后MIF、CD74、Caspases3、Caspases8、E-Cadherin、Tiam1在mRNA水平上的表达量。4、MTT法观察MIFsiRNA、非特异性的siRNA和空白组对大肠癌CT-26细胞增殖的影响。5、酶联免疫吸附法（ELISA）检测MIFsiRNA和非特异性的siRNA转染CT-26细胞后培养液中MIF蛋白的表达量。6、微孔迁移法检测MIFsiRNA和非特异性的siRNA对CT-26细胞体外侵袭的影响。7、流式细胞仪检测MIFsiRNA和非特异性的siRNA对CT-26细胞凋亡的影响。8、Western blot检测MIFsiRNA和非特异性的siRNA对细胞内MIF、CD74、Caspases8蛋白表达量的影响。结果1、荧光siRNA转染到细胞内。2、MIFsiRNA抑制了CT-26细胞的增殖，呈时间-剂量依赖性,非特异性的siRNA与空白组对CT-26细胞没有影响。3、100 nM/ml MIFsiRNA转染后细胞表达MIF、CD74、Tiam1量下降，E-Cadherin、Caspases3、Caspases8表达量升高，与非特异性的siRNA及空白组比较有显著差异，空白组与非特异性的siRNA比较无差异。4、100 nM/ml MIFsiRNA转染细胞24小时后，外分泌MIF蛋白的表达降低，空白组与非特异性的siRNA对外分泌MIF蛋白的表达无影响。5、100 nM/ml MIFsiRNA转染细胞24小时后，细胞穿透聚碳酸酯膜显著减少，与非特异性的siRNA及空白组比较有显著差异，空白组与非特异性的siRNA比较无差异。6、100 nM/ml MIFsiRNA转染细胞24小时后，细胞凋亡增加，较非特异性的siRNA及空白组有显著差异，空白组与非特异性的siRNA无差异7、100 nM/ml MIFsiRNA转染细胞48小时后，细胞内MIF、CD74蛋白表达下降，Caspases8蛋白表达上调，与非特异性的siRNA及空白组比较有显著差异，但非特异性的siRNA与空白组比较无差异。结论1、MIFsiRNA抑制了大肠癌细胞CT-26的增殖，其机制可能为MIFsiRNA降低了MIF与CD74的结合，下调MEK/ERK途径，细胞增殖下降。2、MIFsiRNA抑制了大肠癌细胞CT-26的侵袭，其机制可能为MIFsiRNA导致MIF及Tiam1的表达下降，并导致E-Cadherin的表达上调。3、MIFsiRNA上调了大肠癌细胞CT-26的凋亡，其机制可能为MIFsiRNA导致MIF表达下降，上调Caspases3和Caspaese8的表达。