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水蛭,始载于《神农本草经》,后在《本草纲目》等历代本草和《中国动物药》等专著中均有收载,其应用已有两千多年的历史,是传统的活血化瘀药。本草考证发现,古代的中药水蛭应是吸血动物。中国药典把不吸血的医蛭科动物蚂蟥(宽体金线蛭)及柳叶蚂蟥(尖细金线蛭)作为中药水蛭原动物来源,这与本草学考证的结论不符,把不吸血的蛭类供药用似欠妥当。
菲牛蛭以吸吮人和畜等血液为生,与本草学考证的结论相符;其与已为《中国药典》收录的水蛭(日本医蛭)同属于医蛭科不同属的吸血蛭类品种,具有较大的相似性和亲缘关系;且菲牛蛭分布广泛,资源丰富,易于人工养殖,满足水蛭资源奇缺的要求,具有作为中药材水蛭来源的可行性。因此,很有必要考虑将菲牛蛭作为水蛭药材的来源进行研究。
本文通过对10批菲牛蛭的质量进行初步研究,起草了菲牛蛭质量标准草案,为菲牛蛭的质量控制提供参考。同时,对菲牛蛭及《中国药典》收录的水蛭3种原药材蚂蟥、水蛭及柳叶蚂蟥的抗凝血、抗血栓和降血脂作用进行比较研究,为菲牛蛭作为中药水蛭的药用来源提供理论依据。主要研究内容和结论如下:
(1)对10批菲牛蛭的质量进行研究并起草菲牛蛭质量标准草案。考察项目包括:性状、薄层鉴别及水分、总灰分、酸不溶性灰分、酸碱度、浸出物和含量测定;结果发现,10批药材的水分含量为6.41%~9.12%,总灰分含量为1.17%~2.65%,酸不溶性灰分含量为0.44%~1.32%,酸碱度为7.1~7.3,浸出物含量为8.83%~13.80%,抗凝血酶活性单位含量为106.39U·g-1~172.68U·g-1。
同时,对水蛭3种原药材蚂蟥、水蛭和柳叶蚂蟥的以上各项进行了考察。比较发现,菲牛蛭与水蛭3种原药材的形状特征差别较大;薄层鉴别特征无差异;菲牛蛭的水分和总灰分含量均低于水蛭3种原药材;其酸不溶性灰分含量稍高于水蛭,远低于蚂蟥和柳叶蚂蟥;pH值高于水蛭3种原药材;浸出物含量低于水蛭3种原药材;抗凝血酶活性单位含量低于水蛭,远大于蚂蟥和柳叶蚂蟥。
(2)比较了菲牛蛭与水蛭3种原药材的抗凝血作用。体外抗凝血实验发现,菲牛蛭、蚂蟥、水蛭和柳叶蚂蟥均能延长凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)(p<0.05),且菲牛蛭组的PT、TT、APTT大于蚂蟥、水蛭和柳叶蚂蟥组,表明菲牛蛭及水蛭3种原药材均有较强的体外抗凝血作用,且菲牛蛭强于水蛭3种原药材。
大鼠体内抗凝血实验发现,菲牛蛭、蚂蟥、水蛭和柳叶蚂蟥均能延长大鼠的PT、TT、APTT(p<0.05),表明菲牛蛭及水蛭3种原药材均有较强的体内抗凝血作用,且吸血的菲牛蛭和水蛭强于不吸血的蚂蟥和柳叶蚂蟥,与本草考证相符。
(3)比较了菲牛蛭与水蛭3种原药材的抗血栓作用。体外血栓溶解实验表明,除柳叶蚂蟥的低剂量组外,其余各组均有显著的溶栓作用(p<0.05),其中菲牛蛭和水蛭的溶栓作用最强,显著强于不吸血蚂蟥和柳叶蚂蟥。
对全血凝块的溶解实验结果表明,除柳叶蚂蟥的中、低剂量组外,其他各组在不同时间点对全血凝块均有较强的溶解作用(p<0.05),且随着给药时间的延长,全血凝块溶解率增加,其中,菲牛蛭对全血凝块的溶解作用大于水蛭、蚂蟥及柳叶蚂蟥(p<0.05)。
(4)采用高脂饲料饲喂法成功构建大鼠高脂模型,并以血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)为检测指标,比较菲牛蛭与水蛭3种原药材的降血脂作用。结果发现,与模型组比较,高、中剂量组的TC水平显著降低(p<0.05),高、中、低剂量组的TG水平显著降低(p<0.05),表明菲牛蛭能有效降低高脂模型大鼠的血脂水平。