链霉菌是一种来源于土壤的革兰氏阳性菌,是重要的工业微生物,可以产生各种各样的生物活性物质,被广泛的应用在生物防治植物病害的研究中。玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是从土壤中分离得到对棉花黄萎病菌表现强烈抑制作用的菌株。本研究采用纸碟法,以棉花黄萎病菌为指示菌,对该菌株的培养基、摇床发酵条件进行优化,最后进行了30L发酵罐的小试试验。 本研究首先进行发酵培养基的优化。考察了碳源、氮源、无机盐对发酵的影响,然后再单因素试验的基础上进行了正交试验的优化。确定的培养基配方为:葡萄糖2.4%,淀粉0.8%,玉米浆0.8%,花生饼粉1.5%,NaCl0.4%,KH₂PO₄0.02%,CaCO₃0.3%。改良后的发酵培养基成本降低由原来2.13元/升降低到0.5元/升,降低了76%,在此培养基下发酵,抑菌圈直径比原发酵培养基提高了27%。 对于种子培养基的优化采取在发酵培养基的基础上,改变碳、氮源的含量设计正交试验,以菌体生长量为指标进行种子培养基组成试验。确定了种子培养基配方为:葡萄糖1.8%,花生饼粉0.5%,玉米浆1.4%,NaCl0.4%,CaCO₃0.3%,KH₂PO₄0.02%。 针对培养条件分别进行了种子培养和发酵培养的培养基初始pH值、摇床转速、摇瓶装液量、培养温度的研究并考察了种子培养的种龄和发酵培养接种量。确定的种子培养条件为:初始pH值7.5,装液量50mL/500mL,温度30℃,转速220 r/min,种龄30h。发酵培养基的培养条件是:接种量8%,初始pH 7.5,装液量100mL/500mL,温度30℃,转速200r/min,培养时间120h。并在摇瓶优化条件下测定了摇瓶中的代谢曲线。 在以上试验的基础上进行了30L发酵罐的小试试验。测定了包括pH值、总糖、还原糖、氨基氮、生物量、抑菌圈直径在内的代谢情况,得到了在发酵罐中生物指标和产物合成规律,为发酵放大奠定了基础。