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研究目的：对3例遗传性凝血因子Ⅸ缺陷症的患者进行了临床调查及家系系谱分析，并在分子水平上分析HB基因缺陷及其类型，研究疾病本质及其发病机制，加深对HB的认识。方法：采用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)、凝血因子FⅨ活性(F Ⅸ:C)、凝血因子FⅧ活性（FⅧ：C）等测定进行HB表型诊断；采集HB患者家系先证者及家系其他成员的外周静脉血，提取基因组DNA；根据NCBI上GenBank中的FⅨ基因参考序列，利用Primer Premier5软件设计9对引物，采用PCR法对先证者及可疑携带者FⅨ基因外显子及侧翼序列进行扩增，运用双脱氧链终止法在ABI3730XL测序仪上对PCR产物进行测序，结合Chromas2软件及BLAST将测序结果与GenBank中参考序列进行比对，寻找基因突变；用长链聚合酶链反应(LD-PCR)及琼脂糖凝胶电泳对F9基因大片段缺失进行检测。结果：通过PCR及基因测序，在3例血友病患者FⅨ基因中，其中2例发现错义突变：患者1为国际上相对罕见的一例女性纯合血友病患者，其6号外显子发现g.25377C>T(p. Arg191Cys)纯合点突变；家系1先证者为男性患者，其4号外显子发现g.15437G>A（p.Gly125Glu）点突变；家系2先证者同样也是男性患者，在其基因中发现包含4、5号外显子及4号内含子的11214bp的大片段缺失，为新发现的变异，在国际上首次报道，并通过分段PCR及测序发现了该缺失的在基因组中的具体定位。结论：大部分HB的发病机制的分子基础是FⅨ基因突变；突变类型及基因缺失的严重程度的基因型-表型的相关性并不完全一致；结合PCR及外显子测序是诊断HB患者及携带者最直接、最可靠及比较经济的方法。