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肺癌是全世界发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。随着全世界工业化进程的加快导致空气污染问题日趋严重,肺癌的发病率也在逐年升高。目前,临床上最常用的治疗方法仍是手术、化疗和放疗,但由于化疗的药物存在毒副作用大、稳定性差等问题。因此,亟待开发出用于治疗肺癌患者的低毒、高效的新型小分子药物。本研究旨在探究全新的喜树碱衍生物RY-1-11、RY-1-23抑制肺癌细胞的效果,为抗肺癌药物开发提供前期基础。1.RY-1-11、RY-1-23对不同种癌细胞的增殖抑制作用研究利用MTT法检测化合物RY-1-11、RY-1-23对结直肠癌细胞SW480和Caco-2、前列腺癌细胞LNCaP和PC3、乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7、肝癌细胞HepG2和Hep3B、胃癌细胞MKN28和BGC-823、肺癌细胞A549和NCIH460、正常肠上皮细胞NCM460增殖的影响。结果表明,RY-1-11对正常细胞NCM460的细胞毒性较低,且RY-1-11在3μM、10μM、30μM的处理浓度对肿瘤细胞的抑制作用整体优于RY-1-23。其中,肺癌A549和NCI-H460细胞对RY-1-11的敏感性更强。因此,进一步探究RY-1-11在肺癌细胞中抗肿瘤的活性及其机制。2.RY-1-11对肺癌细胞周期、细胞凋亡、细胞增殖、细胞迁移的影响通过流式细胞检测RY-1-11对肺癌细胞周期与细胞凋亡的影响,实验结果表明RY-1-11对肺癌细胞A549和NCI-H460细胞周期有明显阻滞作用,阻滞皆发生在S期。RY-1-11能显著抑制肺癌细胞克隆形成能力,也能显著抑制肺癌A549、NCI-H460细胞的迁移能力。RY-1-11显著诱导细胞凋亡,且随着处理浓度的增大,凋亡越显著。Western blot结果显示,促凋亡蛋白Bax以及凋亡效应蛋白caspase3表达量明显增加,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量明显降低。3.RY-1-11抑制肺癌细胞增殖的分子机制研究RY-1-11抑制肺癌细胞生长的分子机制探究表明,化合物RY-1-11能下调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白,以及下游通路中周期蛋白cyclinD、原癌基因蛋白c-myc的表达,上调该信号通路抑制因子DKK3和磷酸化的糖原合成激酶GSK3β的表达,以上结果说明RY-1-11能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制肺癌细胞增殖。此外,RY-1-11能够显著降低组蛋白甲基化转移酶EZH2的表达及H3K27me的甲基化水平。综上所述,本课题通过探究全新的喜树碱衍生物RY-1-11、RY-1-23对不同种细胞增殖的影响,进一步确定以RY-1-11和对RY-1-11较为敏感的肺癌细胞为研究对象。RY-1-11能够影响肺癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路抑制肺癌细胞生长。本研究的目的在于探究全新的喜树碱衍生物RY-1-11是否对抑制肺癌细胞有明显的效果并探究其可能的分子机制,为未来抗肺癌靶点药物开发提供前期基础,对肺癌患者的治疗具有潜在的临床应用价值与治疗意义。