飞机草(Eupatorium odoratum Linn.)为菊科泽兰属多年生草本植物,在我国主要分布于南方,是一种生物入侵植物,民间常将其作为清热解毒中草药,治疗跌打肿痛、散瘀消肿,抗菌、解毒等,其有效成分是总黄酮。将飞机草作为抗菌饲料添加剂资源加以开发研究尚未见报道。本研究采集飞机草全草,优化飞机草总黄酮的提取条件,评价飞机草总黄酮提取物对小鼠的急性毒理学安全性,探究飞机草总黄酮提取物对肉鸡生产性能、免疫力和肠道微生物群落的影响,为丰富中草药抗菌饲料添加剂资源提供试验依据。1.以飞机草总黄酮提取率为关键指标,采用超声波辅助乙醇溶剂提取法,通过单因素试验和正交试验设计,获得飞机草总黄酮最佳提取工艺为:提取时间5 h,提取温度70℃,料液比1:60(g/m L),乙醇浓度70%,飞机草总黄酮提取率为7.13%。2.急性毒性试验发现,飞机草总黄酮提取物对昆明种小鼠的口服LD50未测得,而小鼠口服最大耐受量达80 g/kg,表明飞机草总黄酮提取物实际无毒。3.研究了飞机草总黄酮提取物对AA肉鸡生产性能、免疫器官指数和血清免疫球蛋白的影响,发现添加一定剂量的飞机草总黄酮提取物能显著改善供试肉鸡的日增重、料重比和胸肌率(P<0.05);添加400 mg/kg的飞机草总黄酮提取物能显著提高肉鸡胸腺指数、法氏囊指数及Ig G、SIg A水平(P<0.05)。表明飞机草总黄酮提取物具有促进供试肉鸡生长,改善肉鸡的肉用性能,增强肉鸡的免疫功能。4.为了探究飞机草总黄酮提取物对AA肉鸡不同时期肠道微生物群落的影响,通过Miseq平台高通量测序获得细菌16S r DNA片段,应用分类单元聚类分析、多样性分析和分类学分析等生物信息学技术,分析肠供试肉鸡道微生物群落的结构、多样性和丰度。结果表明:在试验期内供试肉鸡的肠道微生物主要集中在厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),其所占比例在95%以上;在试验期1~21d,空白对照组(A1)、低剂量试验组(A2)、中剂量试验组(A3)和高剂量试验组(A4)拟杆菌属所占微生物群落的比例分别为11.98%、14.44%、16.13%和13.14%,且A2、A3和A4组拟杆菌属所占微生物群落的比例比A1分别增加了2.46%、4.15%和1.16%;在试验期22~42d,空白对照组(B1)、低剂量试验组(B2)、中剂量试验组(B3)和高剂量试验组(B4)拟杆菌属所占微生物群落的比例分别为17.63%、16.64%、16.86%和32.44%,且B4组比B1组增加了14.81%。可见飞机草总黄酮提取物能够提高肉鸡肠道有益菌属的丰度,改善肠道菌群结构。综上所述,飞机草总黄酮的最佳提取工艺为:提取时间5 h,提取温度70℃,料液比1:60(g/m L),乙醇浓度70%,飞机草总黄酮提取率可达7.13%。飞机草总黄酮提取物具有良好的口服安全性。飞机草总黄酮提取物按一定比例添加于饲料中,能够促进供试肉鸡生长性能,改善肉用性能;能够提高肉鸡胸腺指数和法氏囊指数,增加Ig G和SIg A水平,增强肉鸡免疫力。飞机草总黄酮提取物能够提高拟杆菌门有益菌属在供试肉鸡肠道微生物中的比例,改善肠道微生物群落结构。