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甘蓝型油菜(Brassica napus L.)是我国重要的油料作物,在长江中下游流域大量种植。不仅可用来生产食用油,而且其饼粕富含蛋白质,也可作为动物饲料。由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的菌核病是一种世界性重要病害,严重威胁着我国油菜的生产。生产上多采用化学法防治菌核病,但是存在着很多问题。近年来,植物GDSL脂肪酶家族基因功能的研究逐渐开展,但是关于甘蓝型油菜GDSL脂肪酶功能的研究较少,特别是抗菌核病领域。本研究中我们通过候选基因关联分析的方法,筛选到了一个与甘蓝型油菜菌核病抗性性状显著相关的基因,并围绕该基因进行了一系列研究工作。本研究的主要结果如下:我们克隆了这个与甘蓝型油菜菌核病抗性性状显著相关的基因,命名为BnGLIP1(B.napus GDSL LIPASE-LIKE 1)。首先通过生物信息学分析方法初步了解了BnGLIP1蛋白的性质,结果发现它属于植物SGNH脂肪酶家族,由360个氨基酸组成,含有20种氨基酸,分子质量约为39.5 KD,理论等电点为4.95。预测结果显示该蛋白磷酸化程度较高,此外它可能是一种亲水性蛋白。BnGLIP1蛋白有信号肽序列,推测其可能为外分泌蛋白。为了更好的研究BnGLIP1的生物学功能,我们通过荧光定量PCR检测了BnGLIP1在甘蓝型油菜不同组织中的表达水平,结果表明,BnGLIP1在甘蓝型油菜各组织中均有表达但表达水平存在差异,且在种子中的表达量最高。此外,我们还探究了甘蓝型油菜经生物和非生物胁迫诱导后BnGLIP1的响应情况,研究发现核盘菌侵染能够引起BnGLIP1的上调表达,外源水杨酸、干旱、高盐等处理均能诱导BnGLIP1的表达。我们构建了重组表达载体pK7FWG2.0-BnGLIP1并利用烟草瞬时表达系统对BnGLIP1蛋白进行亚细胞定位分析,结果发现绿色荧光主要出现在烟草下表皮的细胞间隙,说明它在烟草表皮细胞的细胞间隙中表达,可能是一个外分泌蛋白。为了研究BnGLIP1在植株抗菌核病方面的生物学功能,我们利用烟草瞬时表达系统将BnGLIP1在烟草中进行瞬时表达,发现瞬时表达增强了烟草对菌核病的抗性。我们进一步在拟南芥中过表达BnGLIP1基因,发现它能够增强拟南芥对菌核病的抗性。利用甘蓝型油菜下胚轴遗传转化体系进行了油菜BnGLIP1过表达以及干扰株系的创建。本研究一方面有助于我们了解植物应对菌核病侵染的分子机制,另一方面为今后油菜品种的分子改良以及抗病新种质育种提供了候选基因。