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防御素(defensin)是一族分子量介于3000-5000的内源性阳离子多肽,具有广谱杀菌和免疫调节功能,是肌体防御系统的重要组成部分,前期研究表明,防御素由于其特定的空间结构,可与粘蛋白进行特异性结合。生物粘附给药系统是以粘附性的聚合物为载体的一类药物,通过载体的生物作用,长时间粘附于粘膜而发挥疗效的剂型。生物粘附剂给药部位可以是口腔、鼻腔、眼部、阴道、消化道及特定区段等。本课题利用防御素的生物粘附性,将其修饰于脂质体表面,旨在制备出具有生物粘附性的眼部给药系统。本研究第一部分采用Boc固相合成法合成人源性防御素HNP1 (Human Neutrophil Peptide 1)的一级序列,利用cystein和cystine进行折叠,合成出具有生物学活性的多肽。利用HPLC和MS分别鉴定合成产物的纯度及结构。分别利用荧光标记物kodak-670及IR783标记多肽,通过测定荧光强度的消除,考察HNPl在离体兔角膜表面的滞留效果。同时,考察了HNP1的生物学毒性。结果显示,合成产物的结构正确且纯度高于95%。离体兔角膜实验结果表明HNP1具有一定的生物粘附效果,并且无生物学毒性。本研究第二部分采用HNP1修饰于脂质体表面,构建HNP1修饰的具有生物粘附性的给药系统。合成NHS-PEG-HNP1,选用EPC、胆固醇、NHS-PEG-DSPE,采用逆向蒸发法制备脂质体,将HNPl修饰于脂质体表面,包载荧光素FAM考察HNP1脂质体的释放,脂质体表面的HNPl结合胶体金通过磷钨酸染色在透射电镜下判定。通过与粘蛋白在一定条件下共同孵育,考察粘蛋白对脂质体的粒径影响,从而考察粘蛋白对脂质体表面HNP1的相互作用。结果表明,逆向蒸发法制备的HNPl脂质体粒径主要分布在200nm,HNP1脂质体包载荧光素释放与未修饰脂质体无差别。在与粘蛋白孵育后,修饰有HNP1的脂质体粒径变化趋势有异于未修饰脂质体。本研究第三部分制备了包载5-氟尿嘧啶(5-Fu)的脂质体,建立了5-Fu检测方法学,通过不同制备方法制备脂质体,考察包封率及粒径,优选最佳制备方法。结果显示,利用HPLC测定脂质体中5-Fu的含量方法可行,采用逆向蒸发法结合冻融法制备的5-Fu脂质体包封率为17%,粒径主要分布在200nm,与文献结果一致。本文考察了HNP1与黏蛋白间的相互作用,并测定荧光标记HNP1在离体动物角膜表面的消除动力学,以探讨HNPl用于修饰生物黏附给药系统的可行性。HNP1脂质体和5-Fu脂质体的制备及评价表明了利用HNP1构建生物粘附给药系统是可行的。