【摘 要】
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背景:腭裂是口腔颌面部常见的先天畸形。传统手术治疗根据腭裂临床分类采用不同外科术式,利用裂隙两侧软组织关闭间隙,但骨缺损仍未解决,且术后瘢痕严重,限制上颌骨生长发育。传统的手术治疗已经不能满足于患者的需求。目前,利用人工合成材料修复腭裂骨缺损与功能缺陷是腭裂组织工程学治疗中比较具有前景的发展方向之一。目的:探讨POC（1,8octanediol-co-citrate,1,8辛二醇-共-柠檬酸盐）与
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背景:腭裂是口腔颌面部常见的先天畸形。传统手术治疗根据腭裂临床分类采用不同外科术式,利用裂隙两侧软组织关闭间隙,但骨缺损仍未解决,且术后瘢痕严重,限制上颌骨生长发育。传统的手术治疗已经不能满足于患者的需求。目前,利用人工合成材料修复腭裂骨缺损与功能缺陷是腭裂组织工程学治疗中比较具有前景的发展方向之一。目的:探讨POC（1,8octanediol-co-citrate,1,8辛二醇-共-柠檬酸盐）与HAAM（Human acellular amniotic membrane,人脱细胞羊膜）的复合物修复大鼠腭裂的效果。方法:1、⑴POC的制备:将等摩尔量的1,8-辛二醇与柠檬酸盐加入到三颈圆底烧瓶中,充分搅拌后,在氮气流下将混合物加热至熔化后,降温并持续搅拌以产生预聚物POC。⑵双层交联HAAM的制备:将新鲜的人羊膜清洗干净后用脱细胞液处理,去除羊膜表层的上皮细胞后,将两层羊膜叠加并剪成所需大小后置于冻干机中冻干,制备双层交联HAAM。⑶POC复合双层交联HAAM的制备:先将制备好的POC溶于无水乙醇,待POC完全溶于无水乙醇后,再将制备好的双层交联HAAM置于无水乙醇内,放置于恒温箱中,直至无水乙醇全部挥发后取出制备好的POC复合双层交联HAAM。2、动物实验:选取4周龄雄性SD大鼠24只,体重100±20g。随机分为正常组、裂隙组、HAAM组、POC-HAAM组,每组6只。（1）正常组:不做任何处理;（2）裂隙组:大鼠外科手术造腭裂,裂隙长7mm×宽1.3mm,不做修复,自然愈合;（3）HAAM组:大鼠硬腭中线处外科手术造腭裂,裂隙长7mm×宽1.3mm,双层交联HAAM覆盖修复,缝合;（4）POC-HAAM组:大鼠硬腭中线处外科手术造腭裂,裂隙长7mm×宽1.3mm,POC复合双层交联HAAM覆盖修复,缝合。手术三组加预成腭护板保护创面。术后8周处死全部大鼠。3、检查方法:⑴大体观察:通过大体观察初步判断裂隙组、HAAM组与POC-HAAM组腭部裂隙处是否有新生骨生成。⑵影像学观察:通过CBCT观察新生骨生成部位、分布情况与新生骨量。⑶组织学染色观察:通过HE染色,观察上皮组织的愈合情况、成骨细胞的分布、是否有新生骨生成和POC-HAAM与HAAM是否降解吸收,并测量四组大鼠腭中缝两侧0.65mm处的新生骨面积。结果:1、术前膜性材料的制备:⑴POC的制备:POC制备成功,呈透明胶冻状,较软且粘稠,有一定的弹性。⑵双层交联HAAM的制备:双层HAAM在冻干机中交联在一起,呈半透明状。⑶POC复合双层交联HAAM的制备:POC复合双层HAAM交联制备成功,POC复合双层交联HAAM呈白色不透明状,交联制备的膜上可明显见到白色聚合物POC的均匀附着。2、动物样本的大体观察和CBCT影像学观察:大体观察可见正常组的硬腭黏膜连续完整;裂隙组的裂隙存在,口鼻腔相通;HAAM组与POC-HAAM组的裂隙上方被黏膜完全覆盖,黏膜表面完整,与正常组无明显差异。CBCT的3D图像显示正常组的硬腭连续完整;裂隙组人造骨缺损处无新生骨形成,裂隙未愈合,缺损明显;HAAM组裂隙处可见有较少且散在的新生骨生成;POC-HAAM组可见裂隙处有不均匀的新生骨覆盖,裂隙大部分被骨组织覆盖呈闭合状态,裂隙宽度减小。腭部的冠状面可见正常组硬腭骨板连续致密;裂隙组可见硬腭不连续,腭中缝两侧无骨组织存在;HAAM组裂隙两侧有新生骨生成但新生骨量较少;POC-HAAM组的裂隙两侧均有较多的新生骨形成,并向中线生长。3、组织切片的HE染色观察:HE染色显示,正常组的硬腭黏膜连续,上皮钉突明显,黏膜下可见致密而连续一致的硬腭骨板,左右双侧对称;裂隙组的缺损处无新生骨,硬腭黏膜的连续性在缺损处中断,缺损处的两侧硬腭黏膜沿着缺损骨断端向内生长与鼻腔粘膜融合生长;HAAM组人工造裂处硬腭黏膜完整,新生骨较少,HAAM吸收降解无残留;POC-HAAM组人工造裂处硬腭黏膜连续完整,可见明显的上皮钉突。上皮的结构形态与缺损两侧的正常上皮基本一致。骨缺损处的一端或者两端有明显的新生骨形成,新生骨较成熟并且骨周围可见到大量的成骨细胞。复合物降解吸收,未发现残留的POC-HAAM。4、裂隙处新生骨面积的统计学分析:8周时通过HE染色切片测量腭中缝左右两侧0.65mm的新生骨骨面积,POC-HAAM组腭部组织的新生骨量较HAAM组多,有显著性差异（P<0.05）。结论:（1）SD大鼠人工腭裂模型适合于腭裂的手术整复研究。（2）POC复合HAAM可修复大鼠腭裂的组织缺损,而且对骨组织的缺损修复较单纯使用HAAM效果更佳。
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