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第一章Aurora-B、CENP-U在肝内胆管癌的表达和临床病理关系目的检测Aurora-B、CENP-U在肝内胆管癌组织中的表达,明确Aurora-B、CENP-U与肝内胆管癌临床病理相关因素关系,并了解两者表达相关性。方法检测40例肝内胆管癌组织及癌旁组织Aurora-B、CENP-U表达情况。分别分析Aurora-B、CENP-U与肝内胆管癌临床病理因素的关系,Spearman相关分析法分析二者之间的关系。结果1.Aurora-B、CENP-U在肝内胆管癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。2.Aurora-B表达强度与肝内胆管细胞癌分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期密切相关(P=0.024,0.012,0.026,0.024)。3.CENP-U表达强度与肝内胆管细胞癌肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期密切相关(P=0.037,0.048,0.013)。4.肝内胆管癌中Aurora-B和CENP-U表达水平呈正相关(r=0.647,P<0.0001)。结论Aurora-B与CENP-U作为有丝分裂的重要分子,二者在肝内胆管癌组织中呈高表达且表达水平存在明显相关性;其表达水平与肝内胆管细胞癌的临床分期密切相关,Aurora-B与CENP-U可能共同参与肝内胆管细胞癌发生发展。第二章Aurora-B调控CENP-U影响肝内胆管癌细胞增殖的机制研究目的探讨Aurora-B/CENP-U信号通路在胆管细胞癌增殖中的作用及机制。方法通过构建Aurora-B-Sh RNA质粒,使用lipo2000转入QBC939细胞,建立沉默Aurora-B的胆管癌细胞株QBC939,采用qPCR验证Aurora-B基因的敲低效率,WB检测CENP-U总蛋白及磷酸化CENP-U蛋白(P-CENP-U蛋白)表达。构建CENP-U磷酸化位点(Ser349和Ser350)的组成失活型突变的慢病毒载体,感染胆管癌细胞株QBC939,获得CENP-U组成失活型突变体的胆管癌细胞株QBC939,WB检测p-CENP-U表达水平,CCK8及克隆形成试验检测胆管癌QBC939细胞增殖情况。结果1.沉默Aurora-B的胆管癌细胞QBC939 CENP-U总蛋白及P-CENP-U蛋白表达下降。2.CENP-U磷酸化位点(Ser349和Ser350)的组成失活型突变的慢病毒载体,感染胆管癌细胞QBC939后,胆管癌细胞QBC939增殖能力下降。结论Aurora-B激酶可能通过磷酸化调控CENP-U表达,从而影响肝内胆管癌细胞增殖。