夏枯草果实的成分分析及其抗炎抗氧化活性研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:breeze_86
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目的:夏枯草为唇形科植物夏枯草(Prunella vulgaris L.)的干燥果穗,味苦、辛,性寒,归肝胆经,具有散结消肿、清肝明目的功效,现代研究表明其具有降糖、降压、抗菌消炎、免疫抑制、清除自由基及抗氧化、抗肿瘤、抑制病毒生长等多种药理活性,对多种疾病均有良好的临床治疗效果。目前,对夏枯草的研究主要是对果穗及其黄酮、酚酸类为主的小分子物质进行药理研究,对夏枯草果实部位以及果实挥发油等大分子物质的研究甚少,造成夏枯草资源严重浪费。本文以夏枯草果实为原料,对其小极性部位挥发油与极性部位甲醇提取物的成分表征进行较系统的研究,并就其抗炎抗氧化活性进行初步探讨,为进一步认识夏枯草奠定基础,为新药研发与中药材全方位开发利用拓宽思路。方法:1.利用GC-MS与HPLC法分析30批果实成分,采用“中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统”软件进行模式分析及相似度计算,对共有特征峰成分进行检识,使用主成分分析比较不同产地夏枯草果实之间的差异。2.药物干预脂多糖(LPS,0.1μg?mL-1)建立细胞炎症模型,利用噻唑蓝(MTT)比色法考察不同浓度的药物对RAW264.7细胞增殖的影响,格里斯试剂法(Griess)及酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞分泌一氧化氮(NO)及白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平,以此作为评价指标,考察夏枯草果实的抗炎活性。3.采用ABTS法、DPPH法以及FRAP法测定夏枯草果实的抗氧化能力。结果:1.30批唇形科果实挥发油的主要成分为不饱和脂肪酸亚油酸、角鲨烯等,其中夏枯草含特有活性成分β-香树脂醇。2.建立了夏枯草果实挥发油GC-MS指纹图谱,鉴定了16个共有特征峰。3.建立了不同产地夏枯草果实的HPLC指纹图谱,同时测定果实中活性成分异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量。4.抗炎生物活性结果显示,夏枯草果实挥发油以及甲醇提取物在浓度为23.493.8μg?mL-1时可以显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞分泌NO和TNF-α、IL-6(P<0.01),且具有一定剂量依赖性。5.研究了夏枯草果实挥发油与甲醇提取物的体外抗氧化活性,结果表明其DPPH、ABTS自由基清除作用和Fe2+还原能力均较好。结论:本论文通过对夏枯草果实的GC-MS与HPLC分析,进行初步成分表征,证实了夏枯草果实含有大量活性成分,其挥发油以及甲醇提取物具有良好抗炎抗氧化作用。所建立的指纹图谱为夏枯草果实的质量控制提供了有效手段,为夏枯草的全面利用以及中药材的多方位开发提供了重要依据。
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