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针对临床上游离毛发移植术供体来源不足的问题,我们通过对人发毛囊的显微分离、培养,着重观察培养毛囊中后期的组织形态学改变,探讨体外毛囊生长和周期性再生的变化特点和影响因素,为进一步进行同种异体毛发移植和毛发组织工程的研究提供参考;同时,通过总结实验操作中毛囊分离技术和适宜的培养条件可为目前毛发移植手术中毛囊的分离、保存方法的改进提供线索,以期获得更好的疗效。 方法: 在无菌条件下,取美容除皱术中切除的头皮显微分离出游离的单个毛囊,培养于含10%小牛血清的DMEM培养基中,连续性动态观测毛囊的生长速度及形态学改变30天以上,并取培养前后毛囊制作石蜡切片,对比进行组织学观察,记录结果并照相。 结果: 1、我们成功进行了4批人发游离毛囊的体外培养; 2、在含小牛血清的DMEN中培养的毛囊生长速度较慢,较早进入退化期; 3、培养的毛囊进入退化期后,其毛乳头细胞(DPC)存在两种不同的分布情况:①大部分毛囊的DPC紧缩成团位于退化期毛囊的中段下缘;②另外约30%毛囊的DPC向外游离贴壁生长,上皮样细胞和真皮鞘细胞围绕其向四周呈辐射状生长; 4、改进后的游离毛囊石蜡切片的制作方法同样取得了较好的效果。 结论: 1.人发游离毛囊体外培养中,培养基构成对毛囊的生长有直接影响。含小牛血清的DMEM培养基中生长的毛囊易于进入退化期; 2.体外培养的人发毛囊在培养中后期进入退化期后,毛乳头细胞存在两种分布类型;3.与前人方法相比,我们改进后的毛囊制片方法简化一J’操作步骤,取得了 相同的效果。