炎症是在遇到外来损伤或致病因素时机体的一种常见的防御反应。目前临床中治疗炎症反应的药物主要是西药,但西药有不同程度的毒副作用和药物残留。虽然紫茎泽兰是一种有毒的入侵植物,而紫茎泽兰精油(AAEO)中含有多种抗炎化合物如:α-蒎烯、石竹烯和乙酸龙脑酯等,但对AAEO的抗炎活性并未见报道。本试验通过脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞建立体外炎症模型,检测AAEO对LPS处理后RAW264.7细胞中炎症因子的转录水平以及TLR4蛋白和NF-κB信号通路中关键蛋白的表达水平,来探究AAEO的体外抗炎活性,为AAEO的体外抗炎活性研究提供一定的理论基础和参考价值。研究内容如下:1.AAEO化学分离及其成分分析采用化学分离方法来分离AAEO,并通过气质联用(GC-MS)法检测其化学成分。结果检测出26种化合物,其中具有抗炎活性的物质有9种。表明该种分离方法可以分离出AAEO中的抗炎成分。2.AAEO分离物对LPS诱导RAW264.7细胞分泌炎性因子表达的影响通过CCK-8法检测AAEO分离物的细胞毒性,利用ELISA、RT-PCR法检测LPS诱导的RAW264.7细胞炎性因子mRMA的表达水平和蛋白分泌水平。结果表明:在药物浓度<20 mg/mL时对RAW264.7细胞无细胞毒性,即后续试验选择的药物浓度为:1 mg/mL、5 mg/mL、10 mg/mL。AAEO分离物在1 mg/mL时可以极显著抑制LPS处理后RAW264.7细胞分泌的NO含量,并呈现剂量效应。药物组与LPS组相比均可以极显著抑制IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α蛋白分泌量及mRNA的表达水平,显著上调IL-10蛋分泌量和mRNA的表达水平,且在试验浓度范围内呈剂量效应。表明AAEO分离物可以通过抑制炎症反应中的IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α蛋白质分泌量及mRNA的表达水平,促进IL-10 mRNA蛋白质分泌量及mRNA的表达水平来发挥抗炎作用。3.AAEO分离物对LPS诱导RAW264.7细胞中TLR4蛋白和NF-κB信号通路关键蛋白表达的影响结果表明AAEO分离物可以呈剂量效应抑制LPS诱导RAW264.7细胞TLR4蛋白的表达。能够上调LPS抑制的IκBα蛋白表达量,通过促进LPS诱导RAW264.7细胞中p65和p50胞浆蛋白含量升高,来抑制NF-κB信号通路的激活,从而达到抗炎的目的。结论:AAEO化学分离物中检测出26个化合物其中有9种抗炎物质,在浓度<20mg/mL时对RAW264.7细胞无细胞毒性;能通过调控细胞中TLR4蛋白和NF-κB信号通路中关键蛋白的表达来调控LPS诱导后RAW264.7细胞分泌的炎性因子,从而达到抗炎作用。