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目的:1)探讨RNA结合蛋白QKI-5在肾透明细胞癌中的生物学功能;2)探索引发QKI-5发挥生物学功能的潜在分子机制及其相关信号通路。方法:1)q PCR和western blot检测QKI-5在肾透明细胞癌组织和配对的癌旁非肿瘤组织中的表达差异,并利用TCGA数据库中肾透明细胞癌患者临床资料分析QKI-5表达水平的高低和肾透明细胞癌患者的临床特征及预后的关系;2)应用以慢病毒为载体的过表达技术观察过表达QKI-5,体内及体外实验观察对肾癌细胞增殖作用的影响,以及对细胞周期的影响;3)在上述功能变化的基础上,进一步探索RNA结合蛋白QKI-5发挥上述作用的可能分子机制。结果:1)QKI-5的mRNA表达水平在肾透明细胞癌组织中较其对应的癌旁组织中明显下调,同时在肾癌细胞系中的表达也较永生化肾小管正常上皮细胞的表达水平降低;TCGA数据库资料分析显示QKI-5低表达的患者的T分期更晚,病理分级更高,QKI-5低表达的患者生存率明显差于QKI-5高表达的患者。2)过表达QKI-5能够抑制肾癌细胞株786-0和A-498细胞体外的增殖能力、克隆形成能力以及在裸鼠体内的生长能力;流式细胞术结果显示,过表达QKI-5使786-0和A-498细胞产生G1期阻滞,而这种阻滞与周期相关蛋白cyclin D1表达降低及p21,p27表达增高有关;3)RT-PCR和Western Blot结果显示,过表达QKI-5可以增加RASA1 mRNA稳定性的表达,促进RASA1的表达,提示QKI-5对RASA1是存在正性调节的,并且在组织标本中验证了QKI-5的表达与RASA1的表达呈正相关。进一步的细胞增殖实验验证QKI-5通过直接稳定RASA1的mRNA表达,从而抑制RAS/MAPK/ERK信号通路发挥其抑癌基因的功能。同时采用RNA免疫共沉淀实验确认了QKI-5可通过结合于RASA1的mRNA的3’UTR对其进行正性调控。结论:通过本课题的研究,我们发现QKI-5在肾透明细胞癌肿瘤组织中表达下调,并且QKI-5的表达水平随肿瘤体积的增大而降低,随肿瘤病理分级的增加而降低,与患者的生存期呈正相关。体外实验及体内实验发现QKI-5在肾透明细胞癌中发挥着抑癌基因的功能,可以使细胞周期阻滞在G1期,进一步的细胞实验初步阐明了QKI-5通过对RASA1的转录后调控抑制RAS/MAPK/ERK信号通路发挥其抑癌基因的功能,本研究结果加深了我们对QKI-5在肾透明细胞癌中的生物学功能的认识,而且很可能为日后肾透明细胞癌的治疗提供一个新的治疗靶点。