Neosartorya fischeri P1来源的纤维素酶基因的克隆表达和性质测定

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:finney_young
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
纤维素酶和半纤维素酶是将地球上分布最广、含量最丰富的可再生资源——木质纤维素转化的重要部分。嗜热纤维素酶和半纤维素酶因其自身的特性,在多种行业如饲料、造纸制浆、食品及生物质能源方面有着更广泛的运用。本论文一方面对嗜热真菌Neosartorya fischeri P1分泌的不同家族的一系列嗜热纤维素酶和半纤维素酶进行挖掘并通过毕赤酵母表达系统进行高效表达以实现工业应用,另一方面对合适材料的嗜热纤维素酶基因进行改良,提高其pH稳定性或热稳定性以更好的满足工业需求。通过设计特异性引物,我们从嗜热真菌N.fischeri P1的cDNA中获得了一系列不同的嗜热酶基因并成功在毕赤酵母表达系统中进行了高效表达,包括GH5家族的内切葡聚糖酶Eg15A, GH7家族的纤维素酶Ce17A, GH12家族的内切葡聚糖酶Eg112A及GH12家族的木葡聚糖酶Xyg12A。此外,本研究还以GH5家族的内切葡聚糖酶Eg15A为材料,通过分子改良技术,获得了显著提高其pH稳定性和热稳定性的四个单点突变体Q177E、Q261E、Q288E和Q333E。本论文不仅提供了多个不同家族的嗜热纤维素酶和半纤维素酶的工业候选酶,使纤维素酶和半纤维素酶基因资源得到了丰富,而且还通过实验验证了四个与N. fischeriP1来源的GH5家族Eg15A的pH稳定性和热稳定性都相关的可能位点,为同家族纤维素酶的稳定性机制研究提供了良好的研究材料和理论指导。
其他文献
永泰古城作为甘肃省现存唯一一座以龟为营城意象的防御类古城,虽然古城内居民生活条件比较落后,但永泰古城依然保留着明清时期的空间形态形式,本文对永泰古城空间形态的保护
油气罐区是石油化工企业中常见的工作区域。随着相关行业的发展,油气罐区的重要性与日俱增,但与此同时,其安全事故也屡见不鲜。对罐区事故产生的机理进行系统深刻的剖析并进
腐败是人民群众最痛恨的现象,是我们党面临的最大危害。习近平总书记在党的十九大报告中提出“夺取反腐败斗争压倒性胜利,只有以反腐败永远在路上的坚韧和执着,深化标本兼治,
如今在石油石化行业中,膜法水处理技术占据了越来越重要的地位,但其存在亲水性差、膜易受油污染及水通量低等问题。膜改性是提高膜抗油污染性能的重要手段。本研究在膜制备的
目的探究多种刺激因子对老年痴呆模型大鼠海马中c-fos与NGF的表达特点及影响。方法将60只健康的Wistar大鼠随机分为正常组、模型对照组、模型组、西药组和电针组。电针组施以
目的探讨近30年兰州地区上消化道出血(UGIB)的病因及临床特点。方法回顾性分析1982年1月~2011年12月收治的3490例UGIB患者的住院病历资料,按年龄及入院时间顺序分组,并详细记录临
算子理论产生于20世纪初,由于其在数学和其它学科中的厂泛应用,在20世纪的前三十年就得到了很大的发展。算子范数不等式或等式蕴涵着算子自身的诸多性质,所以针对算子范数不
通常,成人进入医院的感受都是冷漠与单调,更不用说身体本就柔弱的儿童。而医疗空间是每一个孩子在成长过程中都必经的场所,其就医环境也越来越受到家长们的重视,但国内大部分
萝卜(Raphanus sativus L.,2n=2x=18),十字花科萝卜属一、二年生根菜类蔬菜,是广泛种植于我国的重要经济作物。萝卜在生长过程中易受各种病原菌侵袭而诱发病害,导致萝卜品质
目的:通过改进γ射线照射联合环磷酰胺、氯霉素腹腔注射法,构建较稳定再生障碍性贫血(aplastic anemia,简称:再障,AA)小鼠模型,并给予穿龙薯蓣皂苷干预,通过对小鼠外周血细胞的数量、骨髓有核细胞数量、骨髓增生情况等指标的检测,明确穿龙薯蓣皂苷对AA的治疗效果;通过对小鼠骨髓中HIF-1α、NF-κB、STAT3进行检测分析,观察HIF-1α/NF-κB通路在AA小鼠模型中的变化,探讨穿