【摘 要】
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目的本实验研究通过人工模拟缺氧微环境,观察人乳腺癌MCF-7细胞在缺氧环境下增殖及凋亡的情况,初步探讨缺氧对miRNA-21表达的影响及与细胞增值、凋亡的关系。方法1实验分常氧组
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目的本实验研究通过人工模拟缺氧微环境,观察人乳腺癌MCF-7细胞在缺氧环境下增殖及凋亡的情况,初步探讨缺氧对miRNA-21表达的影响及与细胞增值、凋亡的关系。方法1实验分常氧组和缺氧组,常氧组为不含CoCl2(即0μmol/L CoCl2)的完全培养基进行培养,缺氧组为含CoCl2浓度100、200、400μmol/L的完全培养基人工模拟缺氧环境培养细胞。2使用MTT检测缺氧环境下细胞的增殖能力。3利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。4RT-PCR测定不同缺氧程度下miRNA-21和HIF-1α的mRNA表达水平。结果1与空白对照组相比,CoCl2组的细胞增殖受到抑制,随着缺氧时间和缺氧程度的增加,细胞的抑制率逐渐升高,但100、200μmol/L的CoCl2处理组的细胞在一定时间内仍增殖,且差异有统计学意义(P<0.05)。2流式细胞仪检测结果显示,随着缺氧程度的增加CoCl2处理组的细胞凋亡率逐渐升高,并明显高于空白对照组(P<0.05)。3RT-PCR检测结果显示,随着缺氧程度的增加,miRNA-21的表达逐渐升高,且200、400μmol/L CoCl2处理组的miRNA-21表达水平高于空白对照组(P<0.05),CoCl2处理组的HIF-1α的表达水平随着缺氧程度的增加而增加,且高于空白对照组(P<0.05)。结论人乳腺癌MCF-7细胞可在一定缺氧程度和时间内生长。缺氧诱导细胞凋亡率增加。缺氧能上调HIF-1α、miRNA-21的mRNA表达,HIF-1α和miRNA-21的表达正相关。
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