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目的：肝星状细胞的激活增殖是引起肝纤维化形成的中心环节，阻抑激活的肝星状细胞增殖是治疗肝纤维化的重要途径。前期研究发现抗纤软肝颗粒具有显著的抗肝纤维化的作用，并能抑制肝星状细胞增殖、胶原合成和分泌TGFβ1。本实验通过抗纤软肝颗粒对肝星状细胞增殖、凋亡，PDGF诱导的增殖及胞内信号转导的影响，从细胞分子学水平阐明抗纤软肝颗粒抗肝纤维化的作用机制。 方法：1．抗纤软肝颗粒对肝星状细胞增殖及凋亡的影响及机制：传代培养的大鼠肝星状细胞系HSC-T6与中药复方抗纤软肝颗粒（终浓度为40mg／ml、20mg／ml、10mg／ml、5mg／ml、2.5mg／ml、1.25mg／ml、0.625mg／ml）及药物血清（5％、10％、20％）共同培养48小时后，采用MTT法测定细胞增殖、流式细胞仪测定细胞周期，应用TUNEL法及流式细胞仪测定细胞凋亡、免疫组化检测BcL-2／Bax。2．抗纤软肝颗粒对PDGF诱导的HSC增殖及胞内信号转导的影响：采用无血清培养，不同浓度的抗纤软肝颗粒温育肝星状细胞24小时后，PDGF-BB（10ng／ml）刺激24小时，再加入上述浓度的抗纤软肝颗粒，3小时侯后，又加入PDGF-BB（10ng／ml）作用5分钟，然后收集细胞。采用MTT法及流式细胞仪测定细胞增殖及细胞周期，钙指示剂Fura-2／AM测定细胞内Ca2+，免疫印迹化学发光法检测酪氨酸磷酸化蛋白、MEK-1及PI3-K。 结果：1．在细胞增殖方面：抗纤软肝颗粒无论是药物还是含药血清，均能显著抑制HSC-T6增殖，在安全浓度范围内，5mg／ml组和10％药物血清组作用最强，进一步证实抗纤软盱颗粒具有确切的抑制HSC增殖作用（P＜0.01）；无血清培养显示该方对于PDGF诱导的细胞增殖具有抑制作用，并呈剂量依赖性（P＜0.01）。流式细胞术分析提示抗纤软肝颗粒能抑制PDGF诱导的HSC DNA合成期及合成后期以及分裂期DNA百分含量，阻断细胞由静止期／DNA合成前期向DNA合成期转化，呈剂量依赖性（5mg／ml组作用最显著，P＜0.01）。2．在细胞凋亡方面：TUNEL法及流式细胞仪测定抗纤软肝颗粒药物及含药血清均可诱导HSC凋亡，P＜0.05；并能下调凋亡抑制分子Bcl-2，上调促凋亡分子Bax（P＜0.01）。3．抑制PDGF诱导的胞内Ca2+浓度升高：抗纤软肝颗粒5mg／ml、2.5mg／ml、1.25mg／ml各组细胞内Ca2+浓度分别为208.40±11.99nmol／L、285.97±5.82nmol／L、330.77±12.44nmol／L，与PDGF组（380.33±11.05nmol／L）比较有显著性差异（P＜0.01）。4．经抗纤软肝颗粒处理的HSC，其PDGF诱导的蛋白质酪氨酸磷酸化、MEK-1、PI3-K表达水平均降低（P＜0.01）。 结论：抗纤软肝颗粒抑制HSC激活增殖是其发挥抗肝纤维化作用的细胞分子学机制，主要体现在：1．阻止HSC通过G1／S关卡，干扰其细胞周期的正常进行；2．下调Bcl-2／Bax比率，以增加细胞对凋亡的敏感性，从而促进HSC凋亡；3．干扰PDGF在HSC的信号转导，阻断PDGF的生物学效应。