MPO-ANCA相关性血管炎中性粒细胞CD35、CD55、MPO表达以及外周血、尿Ba水平的变化及意义

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背景MPO-ANCA相关性血管炎(myeloperoxidase-specific antineutrophil cytoplasmic autoantibody associated vasculitis,MPO-AAV)是我国最常见的小血管炎类型之一,可表现为显微镜下多血管炎(Microscopic polyangiitis,MPA)、肉芽肿性多血管炎(Granulomatosis with polyangiitis,GPA)及嗜酸性肉芽肿性多血管炎(Eosinophilic granulomatosis with polyangiitis,EGPA)。由于这类疾病发病较隐匿、临床表现多样、进展快,患者常因未及时诊治而导致病情延误甚至死亡。近年来,研究者们通过动物实验、体外实验和临床研究发现补体旁路途径的激活在MPO-AAV的发病及病情进展中可能起到了重要作用。补体系统的激活受到多种因素调控,如CD35、CD55。有研究报道显示CD35、CD55在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)等自身免疫病中,对补体系统的调节起到了重要作用,而在MPO-AAV中,其与补体激活之间的关系尚未见研究报道。目的探讨MPO-AAV患者中性粒细胞活性、补体旁路激活及调节剂水平的变化及其与临床损害间的关系。方法收集40例活动性MPO-AAV患者的全血、血清及尿液,并记录患者的临床损害情况及伯明翰血管炎活动度积分(Birmingham Vasculitis Activity Score-version3,BVAS-V3)。另收集30例健康人全血、血清及尿液作为正常对照组。运用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析MPO-ANCA阳性的患者和健康人外周血中性粒细胞CD35、CD55及MPO的表达,同时运用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法对患者和健康人血清及尿液中Ba水平进行检测,并探讨CD35、CD55、MPO、Ba的水平与患者临床损害间的关系。结果1.MPO-AAV患者组中性粒细胞CD35、CD55的表达水平均高于正常对照组(t=3.339,p=0.001;t=2.180,p=0.033)。MPO-AAV患者组MPO细胞内表达水平低于正常对照组(t=-3.161,p=0.003);MPO-AAV患者组血清Ba浓度较对照组高(Z=-4.641,p<0.001);2.MPO-AAV患者中性粒细胞CD35的平均荧光强度与血清Ba、尿液Ba呈正相关(r=0.336,p=0.034;r=0.324,p=0.041)。3.MPO-AAV患者中性粒细胞CD35的平均荧光强度与患者年龄(r=0.424,p=0.006)、C反应蛋白(r=0.516,p=0.001)、补体C3(r=0.494,p=0.020)、外周血中性粒细胞计数(r=0.415,p=0.008)呈正相关;CD55的平均荧光强度与患者年龄(r=0.514,p=0.001)、总BVAS(r=0.441,p=0.004)、CRP(r=0.377,p=0.020)、补体C4(r=0.445,p=0.038)、外周血中性粒细胞计数(r=0.485,p=0.001)、胸部损害BVAS(r=0.358,p=0.023)呈正相关;MPO细胞内表达的平均荧光强度与补体C4呈正相关(r=0.572,p=0.021);血清Ba浓度与患者病程呈负相关(r=-0.323,p=0.042);尿液中Ba与患者ESR(r=0.373,p=0.025)、CRP(r=0.399,p=0.013)、胸部BVAS(r=0.318,p=0.046)呈正相关。4.MPO-AAV患者中,有肺损害患者较无肺损害患者CD35和MPO的平均荧光强度更高(t=-2.373,p=0.023;t=-2.121,p=0.043);有肾损害患者较无肾损害患者CD55的MFI更高(t=-2.412,p=0.021)。结论1.补体激活抑制因子CD35、CD55在MPO-AAV患者中性粒细胞的表达是显著增强的,可能减少中性粒细胞被激活的补体系统破坏,加重中性粒细胞参与的炎症反应。2.中性粒细胞CD35高表达的MPO-AAV患者肺脏可能更易受到累及;CD55高表达者肾脏可能更易受到累及。3.MPO-AAV患者中性粒细胞内MPO的表达水平明显降低,提示中性粒细胞脱颗粒中的MPO可能在MPO-AAV病情发生和发展中发挥更加重要的作用。4.MPO-AAV患者补体旁路激活明显增加,但周围血中Ba的升高水平与患者临床损害严重性间无显著相关性,患者尿中Ba水平的检测,可能用于协助判断MPO-AAV病情活动性。
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