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自然界中存在很多丰度很低的物质,既有维持生命体正常运作的关键物质生物大分子,也有危害生命体健康的小分子污染物。对生物大分子(植物蛋白质)的研究有利于揭示生命的奥秘,探寻植物抵抗外界胁迫的机理;同时,对小分子环境污染物的分析与监测,为人类和动植物的健康提供保障。由于很多生物大分子和有机小分子在自然界中浓度很低,无法对其进行直接研究,必须进行分离富集。本论文主要工作以制备新型固相金属离子亲和色谱(IMAC)和分子印迹聚合物(MIP)为中心,以富集生物大分子磷酸化多肽及小分子污染物为目标,主要研究成果如下:(1)以纤维素为原料,制备了一种新型的Ti4+-IMAC材料并用以富集水稻中的磷酸化多肽。作为原材料,纤维素来源广泛,成本低,磷酸改性后具有良好的生物兼容性,制备方法简单。对Ti4+-IMAC富集磷酸化多肽的缓冲溶液进行了优化,最佳上样缓冲液为ACN(80%)和TFA(6%)。以a-casein为标准磷酸蛋白,酶解后用Ti4+-IMAC进行富集,检测到14个磷酸化多肽,a-casein检测的最低浓度达2pmol,达到国际水平。最后,Ti4+-IMAC应用到盐胁迫下水稻磷酸化多肽富集中,共检测到30个与水稻抵抗非生物胁迫相关的磷酸化蛋白。(2)以小分子苯基膦酸为模板,合成了一种新型MIP,并应用于水相中富集磷酸化酪氨酸多肽。该聚合物以苯基膦酸作为磷酸化酪氨酸的抗原决定基,作为替代模板,大大降低了生物大分子印迹难的问题,方法简单、高效,成本低,稳定性好,可重复使用。相比于对照材料,MIP对模板分子具有更高的吸附容量和专一识别能力。该材料最终应用于含苯基膦酸类似结构的酪氨酸磷酸化多肽的富集中,相比于商品化的富集材料Ti02,在复杂的多肽环境中,MIP能特异性的富集磷酸化酪氨酸多肽。利用该策略制备的MIP有望应用于真实植物样品中磷酸化酪氨酸蛋白的富集。(3)首次合成了同时具有功能单体、交联剂和抗蛋白非特异性吸附三重功能的两性离子单体,该单体水溶性极佳,为水相中制备MIP提供可能。由于赋予了交联剂功能单体的作用,基于此单体制备的MIP具有更高的吸附容量。同时,两性离子的结构使得该MIP具有抵抗蛋白非特异性吸附在材料表面的功能,使MIP材料有望应用于真实复杂的水环境中。(4)采用"one-pot"策略,水相中制备出了共价型甘露糖印迹聚合物,该方法突破了传统共价型MIP合成过程繁琐,且在有机溶剂中制备的缺点。该MIP对模板分子甘露糖表现出了极高的特异识别性,为共价型MIP的制备提供了新思路。同时,由于糖蛋白中含有甘露糖小分子,该材料为糖蛋白的富集提供了可能。