CD26/DPPⅣ分子是一种高度糖基化的Ⅱ型跨膜蛋白,由两个同源亚单位组成,通过N末端亲水区结合在细胞膜上。人CD26/DPPⅣ基因定位于2号染色体长臂24区,约90kb,含26个外显子,在上游非编码区没有TATA盒或CAAT盒,GC丰富区域含有转录因子结合位点,肝细胞核因子能够激活转录。CD26/DPPⅣ由766个氨基酸残基组成,分子量约ll0KD,胞内肽链极短,仅有6个高度保守的氨基酸序列,跨膜区含22个氨基酸,胞膜外段由738个氨基酸组成,可分为三个结构域:①N末端糖基化区:与跨膜区相连的20个氨基酸形成可弯曲的“茎”区,其后的区域含9个糖基化位点。②富含半胱氨酸区:③C末端催化区:CD26/DPPⅣ属于丝氨酸蛋白酶家族,此家族成员催化部位具有相似的氨基酸序列“Gly-Xaa-Ser-Xaa-GIv”。CD26/DPPⅣ第628-632位氨基酸“Gly-Trp-Ser-Try-Glv”为其催化序列,推测Ser-630为催化残基。CD26/DPPⅣ蛋白有很多生物学功能,在刺激T细胞活化、抑制前列腺癌细胞恶化、抗HIV感染等方面都发挥重要作用。它又是一种蛋白水解酶,能降解肽链N末端第二个残基上的脯氨酸或甘氨酸,产生N端二肽,故称二肽基肽酶。由于该分子的催化活性中心不受糖基化区域的影响,因此我们拟采用RT-PCR方法获得含有人CD26/DPPⅣC末端催化区141个氨基酸的cDNA片段,并构建一个原核表达载体,我们命名为pET-28a-hCD26,通过在大肠杆菌BL21中的表达和蛋白纯化分析,鉴定重组蛋白的酶学活性和抗原性。用hDPPⅣ抗原多肽免疫动物,获得实验动物的抗血清,通过ELISA方法检测抗血清的特异性和效价,最终制备CD26/DPPⅣ的多克隆抗体,进一步探讨CD26/DPPⅣ抗体在诊断前列腺癌方面的临床应用价值。