抗凝血腔内隔绝分叉人造血管的制备和性能研究

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腔内隔绝术是一种治疗血管类疾病的有效方式之一。因其具有手术创伤小、术后恢复快等优点,而备受关注。腔内隔绝术用人造血管是腔内疗法中最重要的组成部分,其性能和质量直接决定腔内疗法治疗是否成功。由于人体自身血管组织具有分叉结构,当使用腔内疗法治疗该结构的血管组织病变时,需要使用与之形状相匹配的人造血管进行修复治疗。本课题采用改造后的小型织造设备,研制了9种不同结构和参数的腔内隔绝分叉人造血管试样。然后,经过清洗、脱胶和定型的后处理工艺后,按照人造血管的国际测试标准,对试样进行了微观形貌、厚度、截面水渗透性、表面亲水性、径向拉伸强度和探头顶破强度的测试和表征,并采用极差分析的方法分析了不同结构和参数对试样性能的影响。为了避免人造血管移植后因凝血和平滑肌细胞过度增殖导致的血管再狭窄和堵塞术后并发症,本课题采用了静电结合法的肝素化涂层和丝素蛋白/肝素混合溶液的肝素化涂层,并对试样涂层前后的物理性能、抗凝血性能等做了对比和分析。最后,通过试样与人源平滑肌细胞的体外培养,验证肝素化的腔内隔绝人造血管试样的对平滑肌细胞的抑制作用和抗凝血作用。正交试验测试结果显示对试样厚度、水渗透性、接触角、径向拉伸强度、顶破强度的影响最大的因素依次为织物组织、织物材料和织物密度。综合分析得出:纯真丝材料的试样更容易满足水渗透性的要求,试样g(组织:平纹;经×纬材料:生丝×熟丝;经×纬密度:1100×2000)的厚度为0.085 mm,水渗透性仅为5.19m L/(cm2×min)。该组试样通过静电结合法的肝素化涂层以后,水渗透性从原来的5.19m L/(cm2×min)提高到4.56 m L/(cm2×min),表面接触角从原来的52.64°变为45.21°,而厚度、力学性能、晶体结构和二级结构没有发生明显的变化,但是该方法得到的肝素化试样可以实现抗凝血和抑制人体血管平滑肌细胞生长的效果。试样经过丝素蛋白/肝素混合溶液的肝素化涂层后,水渗透性从原来的5.19 m L/(cm2×min)提高到1.56 m L/(cm2×min)和1.15 m L/(cm2×min),而厚度和力学性能没有发生显著性变化,水蒸汽处理后的该涂层试样的肝素缓释在144 h的时候仅仅达到60%,而自然风干的该涂层试样在72 h的时候肝素已经完全释放。对自然风干和水蒸汽处理的涂层试样的晶体结构和二级结构分析表明,水蒸气的处理促进了涂层的丝蛋白从silk I向silk II的转变,从而影响了肝素的释放。细胞实验表明经过水蒸汽处理后的该涂层试样在144 h的时候,仍然可以起到抑制血管平滑肌细胞生长的效果,从而避免试样移植后的一段时间内,由于血管平滑肌细胞的过度增殖导致的再狭窄和堵塞问题。综上所述,本课题研制了具有分叉结构的腔内隔绝用人造血管,并对试样的性能进行了表征和优化,结果表明:试样的综合性能优越,基本可以满足腔内疗法治疗血管疾病的要求。将来的实验需要更完善的细胞、动物、甚至临床实验对试样的治疗效果进行进一步的验证。
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