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输血引起的受血者机体免疫力下降,在临床Meta分析中已肯定其可导致受血者肿瘤复发率与术后感染率增加。我们从初期应答细胞APC入手,研究T淋巴细胞激活的免疫功能变化。如果APC递呈的抗原功能障碍,可使整个T细胞增殖抑制;如果增加APC的数量,将扩大T细胞增殖反应的强度。利用CD3/28双抗体模拟第一、二信号的变化探讨免疫上下调节的可能机制,为我们研究输血带来的免疫影响及如何纠正提供可依靠的线索。 1.各血液成份及游离血红蛋白对双向混合淋巴细胞反应的抑制作用利用双向混合淋巴细胞反应(MLR)技术、细胞培养技术及~3H胸腺嘧啶(~3H-TdR)掺入法,将压积红细胞(PRBC)、去白PRBC和游离血红蛋白,按不同浓度比例加入MLR体系,及增加单核细胞浓度,即利用其体外抗原提呈功能,以PBMC(正常APC)的MLR为阴性对照,以环胞A为阳性对照,计算上述因素对MLR的抑制率。随着PRBC、游离血红蛋白剂量的增加,其对MLR的抑制作用逐渐增强,去除白细胞后可以减弱这一抑制作用;加入红细胞量较大时,去白PRBC的抑制作用也相对不明显。两倍APC可以明显减弱红细胞、游离血红蛋白对MLR的抑制作用。我们得出红细胞、粒细胞和游离血红蛋白可能通过干扰APC的提呈功能而抑制MLR,可以应用此方法来解释及证实大剂量输血及去白细胞输血的免疫调节作用。 2.CD3、CD28抗体增强淋巴细胞转化功能的研究 研究CD3、CD28抗体对淋巴细胞转化的增强作用,以期了解与评价应用外周血单个核细胞(PBMC)体外扩增淋巴细胞时双抗体作用特性及APC数量对扩增的影响。利用淋巴细胞转化实验~3H-胸腺嘧啶(~3H-TdR)掺入法、细胞培养技术及流式细胞术(FCM),以包被CD3抗体、CD28抗体诱导PBMC中淋巴细胞转化,增加APC浓度,以CD3抗体刺激PBMC(正常APC)中淋巴细胞转化为对照,以各组刺激指数(SI)来计算各因素对淋巴细胞转化的影响,及分析CD8+CD25+细胞占总转化细胞的百分比变化。正常APC浓度的淋巴细胞转