【摘 要】
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GAPCp是质体形式的GAPDH,国内外研究发现GAPCp广泛存在于植物并参与了植物生长发育过程中的多种生理代谢途径,但是GAPCp在植物抗逆过程行使的功能依然不清晰。本研究以中国春小麦为试验材料,分离并克隆出2个质体GAPCp基因,分别命名为TaGAPCp1和TaGAPCp2基因,对其表达产物进行了亚细胞定位验证;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)探究TaGAPCp1/2基因在不同时期不同
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.31271625)和(No.31271609); 黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点试验室专项(No.10502);
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GAPCp是质体形式的GAPDH,国内外研究发现GAPCp广泛存在于植物并参与了植物生长发育过程中的多种生理代谢途径,但是GAPCp在植物抗逆过程行使的功能依然不清晰。本研究以中国春小麦为试验材料,分离并克隆出2个质体GAPCp基因,分别命名为TaGAPCp1和TaGAPCp2基因,对其表达产物进行了亚细胞定位验证;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)探究TaGAPCp1/2基因在不同时期不同组织中的表达量变化,以及干旱、ABA、H2O2胁迫处理对TaGAPCp1/2基因表达量的影响;克隆TaGAPCp1和TaGAPCp2基因上游启动子序列,并进行序列活性验证和启动子功能分析。试验结果如下:1.中国春小麦TaGAPCp1和TaGAPCp2基因长度分别为1166 bp和1246 bp,两者的序列一致性为83.56%,在系统进化树中与拟南芥的GAPCp亚类聚类在一起。亚细胞定位结果表明,TaGAPCp1/2蛋白分布于细胞非绿色质体。2.qRT-PCR结果表明,TaGAPCp1/2基因在不同时期不同组织的的表达量变化较大,这两个基因的变化趋势比较接近,但表达量差异较大。叶片中TaGAPCp1/2基因在干旱和盐碱胁迫下明显上调,而对ABA等处理不敏感;根中TaGAPCp1/2基因对PEG、ABA和H2O2相对敏感,对盐胁迫不敏感。3.干旱胁迫下,ABA抑制剂预处理小麦使TaGAPCp1/2基因表达量明显降低,H2O2抑制剂和清除剂预处理小麦对TaGAPCp1/2基因表达量的影响较小。4.TaGAPCp1/2基因上游的启动子序列长度分别为1950 bp和1921 bp,均有较高的启动子活性。序列分析表明其序列中含有干旱、低温、ABA等多种非生物胁迫相关元件。功能验证结果显示,这两个启动子对干旱响应最为明显。5.获得含TaGAPCp1/2基因的T2代拟南芥植株分别有5株和73株;含TaGAPCp1/2P启动子序列的T2代拟南芥植株均为0株。
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