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鲍鱼是极为名贵的海珍品之一,素称“海味之冠”,在国际市场上一直享有盛名。近年来,随着我国鲍鱼产量的逐步增加,在鲍鱼加工过程中,占鲍鱼体重20-30%的大量内脏遭到废弃或变成低价产品,造成资源浪费,环境污染。本课题组前期以鲍鱼内脏为原料,提取出鲍鱼脏器粗多糖,并验证了其具有一定的生理活性。本研究对课题组前期提取的鲍鱼脏器活性多糖进行了分离纯化,对其结构、性质进行了研究,并进一步验证了鲍鱼脏器多糖的抗氧化活性。首先将鲍鱼脏器前处理后,通过高压脉冲电场提取,75%7,醇沉淀后得到鲍鱼脏器粗多糖AVP,其提取率为3.0%,其总糖含量为60.39%。然后比较了三种脱蛋白方法对于鲍鱼脏器粗多糖脱蛋白的效果,结果表明Sevag法最佳。脱蛋白后的AVP经DEAE-52纤维素阴离子交换层析得到AVP-1、AVP-2、AVP-3三个组分,得率分别为25.3%、39.7%、15.8%。三种多糖再过葡聚糖凝赓黏-100分子筛柱,测得的洗脱曲线均为单一对称峰：体外抗氧化分析结果表明,鲍鱼脏器粗多糖及三种分离纯化组分均具有一定的还原能力及清除02。·和OH·能力,其中AVP的还原能力大于其他三种组分；AVP-1对O2-·和OH·的清除能力最强,其中在浓度为10mg/mL时,对O2-·清除率达50%以上；在高浓度(大于等于4mg/mL)情况下,对羟自由基可完全清除。此外,本实验通过建立H202诱导的HepG2肝癌细胞氧化应激模型,在细胞水平上评价鲍鱼脏器多糖的抗氧化功能活性,主要评价指标包括细胞存活率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。MTT实验结果表明,AVP-1对提高H202损伤的HepG2细胞存活率效果最显著,优于粗多糖,浓度为60 μg/mL时细胞存活率达89.1%；对MDA含量影响实验结果表明,各多糖组分均具有一定的降低MDA含量的作用,其中粗多糖影响效果优于其他三种组分：对SOD活力影响实验结果表明,AVP-1、AVP-2作用效果优于AVP-3组分。对鲍鱼脏器多糖组分进行化学分析显示,AVP-1组分的多糖含量为93.3%,蛋白含量为1.57%,硫酸根含量为4.7%,分子量为148252；AVP-2多糖含量分别为87.6%,蛋白含量为6.23%,硫酸根含量为9.3%,分子量为75162；AVP-2多糖含量分别为90.4%,蛋白含量为3.8%,硫酸根含量为12.5%,分子量为60954。红外光谱分析结果表明,AVP-1主要键型为以α-糖苷键,含有吡哺糖环；AVP-2中含有吡喃糖环；AVP-3也为α-型多糖,含有吡喃环。气相色谱法分析鲍鱼脏器多糖单糖组成,结果表明,AVP-1主要由L-鼠李糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖七种单糖组成。AVP-2主要由L-鼠李糖、D-葡萄糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖四种单糖组成。AVP-3主要由L-鼠李糖、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、葡萄糖醛酸五种单糖组成。