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铁载体以其对金属离子的高亲和性而广泛应用于医药,工农业及土壤修复等方面,特别是在生物防治病原性真菌方面有着极其重要的应用前景。论文用筛选自蜂蜜的一株具有高产铁载体能力的菌株Bacillus amyloliquefaciens SYBC H47为出发菌株T0,通过ARTP诱变技术进行诱变处理筛选铁载体产量提高显著的菌株;初步优化发酵条件;对突变体全细胞进行SDS-PAGE及蛋白质谱分析;对可能导致突变体铁载体产量提高的基因进行分析及验证。主要研究结果如下:1)为了提高铁载体的产量,通过ARTP诱变技术对B.amyloliquefaciens SYBC H47进行了两次诱变处理。经CAS双层平板结合96孔板初筛,摇瓶复筛,筛选出15株铁载体产量明显提高的突变体,其中突变体T7-14的铁载体产量最高,达到6.0 mmol·g-1,比T0提高155.0%。2)通过单因素实验对突变体T7-14产铁载体的发酵培养基进行了优化,其最优发酵培养基组成为:蔗糖15 g·L-1,酪蛋白氨基酸1.8 g·L-1,pH为7.2,此时铁载体产量最高,为14.4 mmol·g-1,比优化前铁载体产量提高了140.8%。3)将不同培养阶段的T0及突变体T7-14的全细胞蛋白进行SDS-PAGE检测,将表达量明显提高的7个蛋白分别进行蛋白质谱分析,通过比对数据库,其中一个蛋白2,3-二氢-二羟基苯甲酸脱氢酶（2,3-dihydroxybenzoate-2,3-dehydrogenase,DhbA）参与铁载体前体2,3-二羟基苯甲酸（DHB）的合成。4)对B.amyloliquefaciens SYBC H47的基因序列与氨基酸序列进行了比对分析。预测其中与铁载体合成相关的基因有34个,其中2个为调节基因,25个基因与铁载体或Fe-铁载体混合物的转运相关,7个为铁载体合成基因,并且在铁载体合成基因中包含基因簇dhb ACEBF,预测菌株合成的儿茶酚型铁载体为bacillibactin。基因簇dhb ACEBF中dhb A,dhb B,dhbC三个基因参与前体DHB的合成。三个基因大小分别为786 bp、927 bp和1197 bp,蛋白分子量约为27.1 kDa、34.2 k Da和42.8 k Da。将三个目的基因分别克隆到pColdⅡ载体上,然后将重组质粒均转化到E.coli BL21（DE3）,经IPTG及15℃冷诱导表达,对各重组菌株铁载体的分泌量进行测定,实验结果表明dhb A,dhb B,dhb C三基因的表达对儿茶酚型铁载体的产生有不同程度的提高,对比空载体E.coli BL21（DE3）的铁载体产量,表达三株重组菌株分别提高了90.1%,39.6%,209.2%。结合蛋白质谱分析,推测DhbA表达量的增加在一定程度上提高了突变菌株的铁载体产量。